Ras-Raf-Mek-Erk信号通路在调控细胞生长、增殖和分化过程中起着重要作用,该通路中蛋白成员的过度表达或突变会导致肿瘤的发生。B-Raf是该通路中Raf蛋白激酶家族中的一种亚型,其第600位上缬氨酸突变为谷氨酸(即B-Raf^V600E)最为常见,已成为治疗人类癌症的重要靶标之一。候选药物LXK4是由中国科学院广州生物医药与健康研究院设计并合成的一种新型B-Raf^V600E选择性抑制剂,其体外抑制B-Raf^V600E激酶的IC₅₀值仅为35 nM,同时对colo205和HT29细胞系抗增殖活性的IC₅₀值分别为111 nM和92 nM,有很好的抗肿瘤潜能。本文在临床前评价了LXK4的口服成药性,主要研究了其在SD大鼠和比格犬体内的药物动力学特性,评估了潜在的药物相互作用风险,具体如下:（1）建立了血浆中LXK4含量测定的LC-MS/MS分析方法,该方法选择性好,灵敏度高,定量下限可达0.5 ng/mL,线性范围为0.5¹000 ng/mL,日内、日间精密度和准确度以及稳定性均符合生物样品定量分析的相关要求,提取回收率均高于85%,基质效应不明显,可应用于LXK4在大鼠和比格犬体内药代动力学研究中血浆样品的测定。（2）大鼠和比格犬静注LXK4后,血药浓度开始下降迅速,之后下降缓慢,口服LXK4后很快吸收,达峰时间约为1 h。LXK4在的平均消除半衰期均在1.5².4 h之间,无显著差异。在大鼠和比格犬体内的口服生物利用度分别为14.6%、30.5%,存在物种差异。（3）体外采用底物消除法研究LXK4分别在大鼠、犬和人肝微粒体系中代谢稳定性及其差异,LXK4在人肝微粒体系中代谢较快,大鼠次之,在犬肝微粒体系中相对稳定。采用选择性化学抑制剂法研究人肝微粒体中参与LXK4代谢的酶表型发现CYP2C8和CYP3A4是介导LXK4进行I相代谢的主要酶。（4）将人肝微粒体与特异性底物以及药物共同孵育来研究LXK4在体外对P450酶7种亚型的抑制能力。结果显示,LXK4除不能抑制CYP2B6的活性外,对其他酶均有不同程度的抑制作用,其半数抑制浓度(IC₅₀)分别为5.31μM（CYP1A2）、8.77μM（CYP2C8）、4.90μM（CYP2C9）、6.09μM（CYP2C19）、10.1μM（CYP2D6）、8.6μM（CYP3A4,咪达唑仑作底物）、11.2μM（CYP3A4,睾酮作底物）,为预测潜在的药物相互作用风险提供依据。