牛晶状体前囊膜作为角膜内皮细胞载体的研究

来源 :温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shuo19871108
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:  目前,全球有数百万需要进行角膜移植治疗的角膜内皮失代偿患者,而由于全球角膜植片的供应短缺,他们无法进行角膜移植手术而导致失明。同时,尽管我们可以在体外培养人源角膜内皮细胞,但由于体外培养的角膜内皮细胞层(5μm)的厚度过薄,机械性能差,难以通过现有的手术技术将其植入眼内。因此,需要通过材料学方法,制备具有较好力学性能的角膜内皮细胞片,用于角膜内皮细胞层移植,为数百万饱受角膜病困扰的患者带来福音。本研究采用牛晶体前囊膜脱细胞基质来制作角膜内皮细胞片载体,并评估其作为角膜内皮细胞载体的可行性。  材料与方法:  通过眼科手术的方法获取牛晶状体前囊膜。用胰酶去除残留在晶状体前囊膜的上皮细胞。  将牛晶状体前囊膜随机分为两组:  1)新鲜组:置于含1%双抗的PBS中样品;  2)存储组:存储于含1%双抗的PBS中在-20℃冷冻保存2个月后取出,在 37℃的水浴中解冻后的样品。  分别使用紫外可见光(UV-VIS)分光光度计、游标卡尺、Instron拉伸测试仪、并排玻璃扩散池等对新鲜组和存储组的光透过率、机械性能、渗透性进行测量,利用真空干燥后分别称重,测定两种样品的含水量。为了验证不同存储方式对角膜内皮细胞的影响,培养牛角膜内皮细胞,并分别种植在牛晶状体前囊膜(实验组)和组织培养板(TCP)(对照组)。使用LIVE/DEAD TM活力/细胞毒性测试试剂盒(Invitrogen,Australia)定量分析细胞活力。用Nikon TE2000-U显微镜进行细胞显微观察,并通过Image J软件计算钙黄绿素-AM阳性细胞标记所示活细胞的百分比,评估牛晶状体前囊膜作为牛角膜内皮细胞载体的可行性。  结果:  研究结果表明新鲜组和储存组的牛晶状体前囊膜物理性能无明显差异。同时两者光透过率、机械强度、葡萄糖和蛋白质的渗透性、平衡含水量(EWC)等均符合人角膜内皮植片的质量标准。我们在体外细胞培养实验发现培养出的牛角膜内皮细胞细胞密度、细胞形态与牛角膜内皮细胞的典型生理形态接近。通过免疫荧光染色结果显示牛角膜内皮细胞具有在体内维持角膜功能所需的紧密的细胞连接与Na+/K+-ATP酶活性。  结论:  储存的牛晶状体囊膜具有与新鲜晶状体囊相似的机械特性,光学性能和生物学表现(葡萄糖和蛋白质的渗透性)等。与对照组(组织培养板)相比,两者都可以促进牛角膜内皮细胞的生长,通过免疫荧光染色显示,都显示出类似于健康角膜内皮的单层细胞结构。试验的结果表明,新鲜的和储存的牛晶状体前囊膜都可以在体外支持牛角膜内皮细胞生长,并且可以作为组织工程化的角膜内皮载体的材料。
其他文献
目的本研究旨在了解泰安市三级综合医院手术室护理人员对术前访视、术后随访和术后转运认知情况,结合调查现状分析影响因素,从而发现整体护理与优质护理中的薄弱环节,提高护
  本研究首先检测急性白血病细胞GPI-PLD活性和mRNA表达水平,并进一步分析GPI-PLD与急性髓性白血病(Acutemyeloidleukemia,AML)患者肝、脾和/或淋巴结肿大的关系。继而用GPI-
摘 要: 班主任是班集体的组织者、管理者和指导者,是学生健康成长中不可缺少的一个人物。同样,在农村小学管理中,班主任这一职位仍是任何人都无法取代的。为了提高学生的学习效率,为了端正学生的学习态度,使学生以积极的心态走向课堂学习活动,更为了促使学生获得良好的发展,在班级管理中,班主任要从思想和行动两方面入手,双管齐下,确保学生在良好的课堂环境中获得良好的发展。  关键词: 农村小学班主任 班级管理
目前农村小学生大多数是留守儿童,还有部分学生是单亲家庭。很多家长外出打工,孩子一般由爷爷奶奶照看,父爱母爱的缺失,使这些孩子逐渐形成了以自私,冷漠、懒惰的不好品质;有的放任自流,形成了一些坏习气;不少留守儿童交通安全、饮食卫生安全问题得不到保障,每到夏季,全国溺水死亡的农村学生人数更是高得惊人。  严峻的现状让我们深刻地感受到做好农村班主任管理工作的重要性、迫切性。做好农村班主任工作靠什么呢?是渊
期刊
在幼儿园美术课堂教学中对幼儿进行适当的鼓励性评价,对提高幼儿绘画兴趣及自信心有极大帮助。《幼儿园教育指导纲要(试行)》要求教师树立正确的教育观,改善教育行为,采取多
摘 要: 艺术是人类感受美、表现美和创造美的重要形式。每个幼儿都有对美的理解和表达,美术活动恰恰是幼儿最直接表达自己对美的理解的途径,大胆动手操作,运用画、剪、贴等不同艺术形式,不仅感受到美,还能更好地锻炼幼儿的动手、表达能力,增强幼儿自信心,丰富想象力和创造力,从而得到不同形式能力的提高。  关键词: 幼儿能力 美术活动 能力发展  现代教育形式改变了传统幼儿教育,从“学会知识”到“学会学习”,
摘 要: 幼儿园课程开发与可利用的资源丰富多样,合理地使用这些资源能创造出灵动多样与丰富有趣的学习环境,让孩子在园区内获得无尽的快乐。但是,如何充分开发与利用幼儿园课程资源,这需要园方做出深入性的思考和研究。本文将从物质资源和非物质资源两大类展开系统的分析与论述。  关键词: 幼儿教育 课程资源 物质资源 非物质资源  作为幼儿教育的原材料,课程资源一直都被各幼儿园的负责人重视,合理地开发与利用这
幼儿是民族的希望、祖国的未来。数学教育作为幼儿园教学的重要组成部分,如何在幼儿阶段就为他们打好理性思维基础,是幼儿园数学教育应重视和深究的问题。那么,如何在幼儿园开展趣味数学教育呢?  一、激发幼儿学习数学的兴趣  兴趣是人们探索某种事物带有情感色彩的认识倾向,是幼儿初步学习数学知识,发展思维能力的内在积极因素,因此,在幼儿教育教学中,我们要重视激发幼儿学习数学的兴趣。  1.使用科学、灵活的教学
期刊
摘 要: 数学教学活动是开发智力、促进思维发展的重要学科,在幼儿园教学实践中发挥着不可替代的作用。本文主要立足幼儿园教学实践,以数学教学为研究对象,探索其存在的问题及切实可行的应对策略。  关键词: 幼儿园 数学教学 问题 策略  幼儿园是我国学前教育的重要组成部分,是完善幼儿身心健康的基础性保障,是集中进行幼儿保育和教育的场所。幼儿园的主要任务是更好地解除家庭在培养儿童过程中受时间、空间、环境的
“宝宝,你怎么比男孩还调皮啊,你能不能像个女孩子一样啊!”一位妈妈对弄坏玩具的小女孩这样说。这不禁引人深思,为什么认为男孩调皮是正常的,女孩子调皮就一定不合理呢?  这句话看似平常、随意,却饱含了偏见:1.男孩都调皮。2.女孩该文静;3.男孩可以调皮,但女孩不可以。成人总喜欢用传统眼光对待孩子,不愿意了解孩子的真实想法,却喜欢用传统概念限制孩子的天性,以偏见扼杀孩子成长空间。  一、成人的偏见给孩
期刊