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目的:1.研究慢性阻塞性肺疾病（Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD）模型大鼠体内炎性因子的含量变化、巨噬细胞迁移抑制因子（macrophase migration inhibitory factor,MIF）及其受体复合物CD74/CD44、受体介导的信号通路p38MAPK、AKT的mRNA及蛋白相对表达量,探讨MIF在COPD大鼠病理生理过程中可能作用机制;2.本实验通过电针COPD模型大鼠的双侧“足三里”（ST36）和“肺俞”（BL13）穴,从病理形态、炎症介质等方面观察电针的治疗效果,电针与MIF及其受体复合物、受体介导的信号通路之间的关系,探讨MIF在电针治疗COPD大鼠中的作用机制,从而为针刺治疗COPD提供有力依据;3.观察MIF特异性拮抗剂ISO-1/针刺联合ISO-1对COPD大鼠肺组织病理学形态、肺通气功能、MIF及其受体复合物、受体介导信号通路的表达的影响,探讨ISO-1在针刺治疗COPD大鼠中的可能作用。方法:1.分组:70只健康成年SPF级体质量250300g的雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为7组（N=10）,分别为正常组、模型组、模型+电针组、模型+ISO-1+电针组、模型+DMSO+电针组（溶媒对照组）、正常+ISO-1+烟熏组、正常+DMSO+烟熏组（溶媒对照组）。2.干预:采用香烟烟熏联合气管滴注脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）的复合方法制备COPD大鼠模型,烟熏1个月后通过测定大鼠肺功能以及观察大鼠肺组织病理形态判断COPD大鼠模型制备成功与否。模型+ISO-1+电针组大鼠在电针前30min腹腔注射MIF特异性拮抗剂ISO-1（120ug/kg）,溶媒对照组以等量的1%DMSO溶解液腹腔注射,持续7天;正常+ISO-1+烟熏组大鼠隔日于每次烟熏前30min腹腔注射ISO-1,溶媒对照组以等量的1%DMSO溶解液腹腔注射,持续1个月。3.电针:电针组选取大鼠下肢双侧“足三里”（ST36）穴和“肺俞”（BL13）穴,针灸针刺入大鼠双侧穴位后,同侧两针柄分别连接电针治疗仪的输出端,参数选择采取4/20 Hz交替频率,持续0.5 ms,强度设置为1-3 mA,以引起大鼠下肢微微抖动为宜。每日进行针刺,每次电针时间为30分钟,持续7天。4.检测:ELISA法检测各组大鼠血清、支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）和肺组织内MIF、TNF-α、IL-1β和IL-8含量;定量PCR和Western blot法检测各组大鼠肺组织内MIF及CD74、CD44、p38MAPK、AKT mRNA以及蛋白相对表达量;免疫组化法观察各组大鼠肺组织中CD74、CD44的表达及分布。结果:1.大鼠在烟熏联合LPS气管滴注干预后,与正常组大鼠比较,其肺通气功能明显下降,用力肺活量容积（FVC）,第0.1秒用力呼气容积(FEV0.1),第0.3秒用力呼气容积(FEV0.3),FEV0.1/FVC以及FEV0.3/FVC均显著降低（P<0.01）;COPD大鼠肺组织出现大量炎性细胞浸润,肺泡腔扩大,肺泡结构发生病理改变,符合临床COPD患者的病理形态学改变;此外,COPD模型组大鼠血清、BALF和肺组织内炎性因子含量显著升高（P<0.01）,模型组大鼠肺组织内MIF、CD74、CD44、p38MAPK、AKT的mRNA和蛋白表达,以及肺组织中CD74、CD44的免疫阳性表达水平升高（P<0.01）。2.电针治疗COPD大鼠一周后,与模型组大鼠比较,模型+电针组大鼠肺通气功能指标均显著升高（P<0.01）;模型+电针组大鼠血清内MIF和IL-1β含量显著降低（P<0.01）,TNF-α和IL-8降低（P<0.05）,其BALF和肺组织内炎性因子含量明显降低（P<0.01）;模型+电针组大鼠肺组织内MIF、CD74、CD44、p38MAPK、AKT的mRNA和蛋白表达,以及肺组织中CD74、CD44免疫阳性表达水平均有降低（P<0.01）。3.电针前给予大鼠腹腔注射MIF拮抗剂ISO-1,与模型+电针组相比,模型+ISO-1+电针组大鼠血清和BALF中TNF-α、IL-1β、IL-8含量降低（P<0.01）,MIF含量降低（P<0.05）,肺组织内MIF、IL-1β和IL-8含量降低（P<0.01）,TNF-α表达水平降低（P<0.05）;肺组织内MIF、CD74、CD44、p38MAPK、AKT的mRNA和蛋白表达量显著降低（P<0.01）;肺组织CD74、CD44免疫阳性表达分别呈不同程度地降低（P<0.01;P<0.05）,模型+ISO-1+电针组与溶媒对照组间各检测指标有显著差异（P<0.01）。4.烟熏前给予大鼠ISO-1预处理,与模型组相比,正常+ISO-1+烟熏组大鼠血清、BALF和肺组织内炎性因子含量显著下降（P<0.01）;大鼠肺组织内MIF、CD74、CD44、p38MAPK、AKT的mRNA和蛋白表达,以及肺组织中CD74、CD44免疫阳性表达水平降低（P<0.01）;正常+ISO-1+烟熏组与溶媒对照组间各检测指标有显著差异（P<0.01）。结论:1.香烟烟熏联合气管滴注LPS的复合方法可成功复制COPD模型大鼠,本实验中制备的COPD模型大鼠符合临床中COPD主要病理学变化以及肺功能特点。2.MIF在香烟烟雾及LPS的诱导下大量释放,且能够通过其受体复合物CD74/CD44激活p38MAPK、AKT信号通路,使下游炎症介质的表达增加,可知MIF参与了COPD的病理生理过程。3.电针治疗可以有效抑制MIF的生成,下调或抑制其受体复合物CD74/CD44及受体后p38MAPK、AKT信号通路,进而抑制炎症介质的表达,改善肺部炎症及肺功能,提示电针对COPD模型大鼠治疗效果显著,其作用机制可能与抑制MIF及其受体通路等有关。4.MIF特异性拮抗剂ISO-1预处理能够有效抑制COPD大鼠肺组织内MIF表达,通过其受体复合物阻断p38MAPK、AKT信号通路,从而下调下游炎症因子表达水平,发挥对COPD大鼠的保护作用;此外,电针联合MIF特异性拮抗剂ISO-1治疗COPD大鼠具有协同作用,能够显著下调大鼠体内炎症水平,改善其肺通气功能,对COPD大鼠治疗效果显著。