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目的: 1、构建针对人转录因子ETS1的RNA干扰质粒并鉴定。 2、建立干扰质粒稳定转染的人胰腺癌PANC-1细胞株。 3、研究ETS1与PANC1增殖的相关性。 方法: 1、分别构建3条针对ETS1基因的shRNA干扰质粒(shRNA-1，shRNA-2，shRNA-3)。 2、Western blot法检测干扰质粒的干扰效果。 3、将具有最佳干扰效果的质粒转染至人胰腺癌PANC-1细胞株，用药物G418筛选出稳定细胞株。 4、Western blot法鉴定稳转细胞株中ETS1蛋白表达量。 5、MTT法检测ETS1基因沉默对胰腺癌细胞株PANC1增殖能力的影响。 6、半定量RT-PCR(Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction)法检测ETS1基因沉默对胰腺癌细胞株PANC1中cyclinD1的影响。 7、Western blot法检测ETS1基因沉默对胰腺癌细胞株PANC1中cyclinD1的影响。 结果: 1、3条针对ETS1基因的shRNA干扰质粒转染胰腺癌PANC-1细胞株后，Western blot检测结果显示干扰质粒1(shRNA-1)具有最佳干扰效果。 2、将具有最佳干扰效果的质粒稳定转染人胰腺癌PANC-1细胞株后，经Western blot鉴定相较于对照组稳定细胞株其ETS1表达量明显降低。 3、ETS1基因沉默的PANC1细胞株相较于对照组细胞株增殖能力明显减弱。 4、相较于对照组，cyclinD1的表达水平在ETS1基因沉默的PANC1细胞株中明显降低。 结论: 1、成功构建了针对人转录因子ETS1的RNA干扰质粒。 2、成功建立其稳定转染的人胰腺癌PANC-1细胞株。 3、ETS1基因沉默通过抑制cyclinD1抑制胰腺癌细胞株PANC1增殖。