卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一,发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而居第三位,但卵巢癌病死率居各类妇科恶性肿瘤的首位。5年生存率不足30%,严重威胁女性健康和生命。卵巢癌早期症状隐匿,常在症状出现之前已经出现转移,大多数患者就诊时已处于晚期。卵巢癌的临床治疗以手术为主,化疗为辅,并配合放疗、生物学治疗等手段。近年来,随着医学分子生物学理论和技术的发展,卵巢癌的基因治疗成为大家关注的焦点,并在临床上取得了较好的疗效,具有较好的应用前景。CUL4B(Cullin 4B)作为支架蛋白参与构成E3泛素连接酶复合物Cullin4B—Ring E3 Ligase(CRL4B),参与调节包括细胞周期、细胞信号转导、基因转录和生物体个体生长发育等多项重要生命活动。CRL4B不仅可以通过泛素化降解p53和cydin E参与调控细胞增殖和衰老过程,还能通过单泛素化H2A蛋白,调节靶基因启动子组蛋8113的乙酰化以及甲基化等过程,从而在表观遗传水平上调控p16、p21、PTGDS、miRNA一371/372等基因的表达。越来越多的证据显示CRL4B在肿瘤发生发展中发挥重要作用。CRL4B可以通过单泛素化H2AKl 19,抑制Wnt拮抗因子、PTEN、IGFBP3币tlmiR.194的表达。在宫颈癌、肝癌和非小细胞肺癌等癌症中,CRL4B通过抑制肿瘤抑癌基因的表达发挥癌基因的功能。CuL4B在不同环境下在肿瘤的发生和发展发挥不同的功能。截止到目前,CUL4B在卵巢癌中的作用还未见报道。本课题旨在探究CUL4B对卵巢癌细胞的影响。首先,利用免疫组织化学检测了人卵巢癌组织和癌旁组织中CUL4B的表达,结果提示人卵巢癌组织中CUL4B的表达明显上调。随后,我们选取了人卵巢癌细胞系HEY细胞,利用脂质体转染,构建了si-RNA-CUL4B转染的CUL4B低表达的实验组细胞系和相对应的空载体转染的对照组细胞系。通过cck-8实验检测CUL4B对卵巢癌细胞增殖活性的影响,结果提示抑制CUL4B的表达可以抑制卵巢癌细胞的增殖活性。通过划痕实验检测CUL4B对卵巢癌细胞迁移和增殖能力的影响,结果提示CUL4B的敲低可以抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力。通过蛋白免疫印迹的方法检测CUL4B对卵巢癌细胞的上皮间质转化的影响,结果提示CUL4B的敲低可以抑制卵巢癌细胞的上皮间质转化。总之,通过本实验,我们验证了CUL4B在人卵巢癌组织中的上调,并利用细胞实验表明了通过抑制CUL4B的表达可以抑制人卵巢细胞的增殖活性、迁移、侵袭能力和上皮间质转化,这些结果都提示了CUL4B在人卵巢癌细胞中发挥着原癌基因的作用。这为进一步探究CUL4B的功能提供了新的数据和思路,也为进一步探究卵巢癌的发生机制呈现出新的发展前景。