论文部分内容阅读
目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和促血小板生成素(TPO)联合应用对新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)的神经保护作用以及可能机制,为临床联合应用G-CSF和TPO治疗HIE提供理论基础。方法90只7日龄新生SD大鼠随机分为假手术组、缺氧缺血造模组、G-CSF组、TPO组及联合治疗组,每组18只。后4组采用改良Rice法制备新生大鼠HIE模型,假手术组不作动脉结扎及缺氧处理。其中G-CSF组造模后30分钟腹腔注射50ug/kg稀释G-CSF,TPO组造模后30分钟腹腔注射15U/10g稀释TPO溶液,联合治疗组造模后30分钟腹腔注射50ug/kg稀释G-CSF溶液及15U/10g稀释TPO溶液,而造模组造模后30分钟腹腔注射等体积的生理盐水。每组均测量7日龄及9日龄新生大鼠体重评估发育情况。于9日龄对每组新生大鼠进行翻正反射、负向趋地反射及前肢悬吊测试的急性期行为学评估;采用TTC染色测定脑梗死面积;尼氏染色评估大脑皮质及海马CA1区神经细胞损伤情况;Western-Blot检测脑组织炎症相关蛋白IL-1β、TNF-α和IL-10的表达水平。结果体重增长情况:与造模组相比,其余治疗组幼鼠体重均比造模组幼鼠体重增加明显(P<0.05);联合治疗组幼鼠体重比G-CSF治疗组及TPO治疗组幼鼠体重增加明显(P<0.05)。急性期行为学评估结果:与造模组相比,其余治疗组大鼠评估结果均明显改善(P<0.05);与G-CSF组及TPO组相比,联合治疗组大鼠评估结果明显改善(P<0.05)。TTC染色结果:与假手术组相比,其余各组新生大鼠的脑梗死面积均明显增加(P<0.05);与造模组相比,其余治疗组的脑梗死面积均明显减少(P<0.05);与G-CSF组及TPO组相比,联合治疗组的脑梗死面积明显减少(P<0.05)。尼氏染色结果:与假手术组相比,余下每组皮质及海马CA1区尼氏染色阳性细胞数均明显减少(P<0.05);与造模组相比,其余治疗组的尼氏染色阳性细胞数均明显增多(P<0.05);与G-CSF组及TPO组相比,联合治疗组的尼氏染色阳性细胞数明显升高(P<0.05)。WesternBlot检测结果:1.IL-1β、TNF-α:与假手术组相比,其余每组表达水平显著升高(P<0.05);与造模组相比,其余治疗组的表达水平均明显降低(P<0.05);与G-CSF组及TPO组相比,联合治疗组表达水平显著降低(P<0.05)。2.IL-10:与假手术组相比,其余每组表达水平显著降低(P<0.05);与造模组相比,其余治疗组的表达水平均明显升高(P<0.05);与G-CSF组及TPO组相比,联合治疗组的表达水平显著升高(P<0.05)。结论G-CSF和TPO联合应用通过加强抗凋亡、抗炎作用减少HIE新生大鼠的脑损伤,有利于急性期体重增长及神经功能恢复。