捻转血矛线虫是寄生于牛羊等反刍动物皱胃的主要寄生性线虫,以吸取宿主血液为食,患病动物表现为贫血、水肿、腹泻和消瘦等症状,严重者甚至死亡,给畜牧业造成了巨大经济损失。目前捻转血矛线虫的防治主要使用伊维菌素等驱虫药,但随着时间的推移,耐药性问题日趋严重。有研究表明,P-gp-2基因与耐药性相关,本论文结合我们分离的捻转血矛线虫虫株,以国际标准虫株为对照,对此进行了深入研究。(1)利用幼虫移行抑制试验,以捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)国际标准耐药虫株(Hc-R)和国际标准敏感虫株(Hc-S)为对照,对国内捻转血矛线虫分离虫株CYHHc-136及YCHc-022进行了耐药性比较检测。结果显示,Hc-R虫株和Hc-S虫株的耐药比率为11.16;CYHHc-136虫株和Hc-S虫株耐药比率为10.97;YCHc-022 虫株和 Hc-S 虫株耐药比率为 1.05;CYHHc-136 虫株和 YCHc-022虫株耐药比率为10.48;在国内分离虫株中,CYHHc-136虫株对伊维菌素存在耐药性;而YCHc-022虫株属于敏感虫株。(2)采用RT-qPCR技术,对伊维菌素作用前后的捻转血矛线虫国内分离虫株CYHHc-136和YCHc-022以及国际标准敏感虫株(Hc-S)和耐药虫株(Hc-R)的P-gp-2基因的表达情况进行了研究。结果显示:伊维菌素作用前后,两耐药株之间以及两敏感株之间的P-gp-2基因表达量变化无显著差异,但伊维菌素作用前后捻转血矛线虫耐药株(Hc-R、CYHHc-136)的P-gp-2基因表达量显著高于敏感株(Hc-S、YCHc-022)。表明P-gp-2基因在耐药株中的表达高于敏感株。(3)利用RNAi技术对Hc-R国际标准耐药虫株及分离的CYHHc-136耐药虫株P-gp-2基因进行深入探讨。结果表明,与干扰前相比,RNAi后的捻转血矛线虫P-gp-2基因的表达量显著下调(P<0.01)。伊维菌素作用下,RNAi后幼虫的身体弯曲频率、头部摆动频率以及幼虫摄食率均呈现下调趋势,进一步表明了 P-gp-2确为耐药性相关基因。上述研究结果为线虫耐伊维菌素药物检测方法的建立以及虫株耐药性机制的探讨,提供了重要参考数据。