新疆北疆部分集约化奶牛场牛病毒性腹泻病毒分子流行病学调查

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为了解北疆地区牛病毒性腹泻病毒的感染状况,以及BVDV的基因型的分布。从新疆北部奶牛场中采集牛全血、抗凝血及直肠粘膜。利用新疆农垦科学院牛病毒性腹泻病毒标准化(BVDV)抗原捕获ELISA检测试剂盒检测粘膜中的牛病毒性腹泻病毒,采集样品192头份,576份,平均阳性率为35.4℅;样品的阳性率在发病牛场为100℅,看似正常牛场的检出率0-57.9℅不等;正常牛场的平均阳性率为23.5℅。根据牛病毒性腹泻病毒的标准毒株NADL的5′-UTR保守区设计引物,用RT-PCR方法检测牛血液的牛病毒性腹泻病毒。目的片断回收克隆测序,并用DNAMAN,Primer等生物信息学软件分析,作出新疆北部地区奶牛的牛病毒性腹泻病毒的系统进化树;根据标准毒株NADL的5′-UTR保守区设计分型引物,并用RT-PCR方法鉴定其基因型,结果新疆北部地区所采集的样品均为BVDV-Ⅰ型。培养胎牛肾细胞(MDBK),将挑取的阳性样品的牛血液经反复冻融,离心处理后,过滤除菌接入长满单层的MDBK细胞,经连续盲传四代后,判断采集样品的生物型,结果:所有选取的样品均未致细胞病变。生物型为非致细胞病变型(ncp)。
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