唐菖蒲（Gladiolus hybridus Hort.）是鸢尾科唐菖蒲属多年生球根花卉,是享誉世界的四大切花之一,在各国鲜切花生产及消费中处于举足轻重的地位。唐菖蒲虽然生长健壮,但耐寒力较差,易受霜害,生长临界低温仅为3℃,低温成为限制唐菖蒲分布和生产的因子。现代唐菖蒲品种大多为夏花型品种,在冬季气温较低的地区,露地栽培仅在春夏季节,其栽培范围受到了很大的限制,同时由于病寒冷导致植株生长发育不良,降低种球和切花的品质,大大影响了唐菖蒲的观赏品质和经济品质,因此需要培育出抗寒品种。转录激活因子CBF1能够诱导低温调节蛋白（COR蛋白）的表达,使未经过低温驯化的植株具备一定的抗冻力,因此通过转化CBF1基因,可以提高唐菖蒲的抗寒性,成为提高唐菖蒲产量和改善品质的有效途径。本文以唐菖蒲品种‘金色原野’（God Field）为试材,以球茎芽为外植体,研究了愈伤组织经体细胞胚再生的过程,建立了高频的体细胞胚再生体系;并在此基础上以唐菖蒲体细胞胚为遗传转化受体,通过农杆菌介导法将转录激活因子CBF1转入唐菖蒲,建立了稳定的遗传再生体系,经PCR检测获得阳性植株,为培育拥有我国自主知识产权的抗寒耐逆品种提供理论和试验依据,研究结果如下:1.唐菖蒲体细胞胚再生体系的建立:以球茎芽切片为外植体,胚性愈伤组织诱导最佳培养基为MS+2,4-D4mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L,确定最佳体细胞胚诱导培养基为MS+2,4-D0.5mg/L+TDZ0.3mg/L+蔗糖30g/L+甘露醇30g/L+琼脂7.5g/L;将产生的体细胞胚首先接种于MS+蔗糖30g/L+甘露醇30g/L+琼脂7.5g/L中使其充分发育,随后转入MS+6-BA1.0mg/L+蔗糖30g/L+甘露醇30g/L+琼脂7.5g/L培养基中诱导萌发,再转入MS+IBA1.5 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L培养基中诱导生根,最后驯化移栽使其形成完整植株。2.庸菖蒲体细胞胚遗传转化体系的建立:以体细胞胚为遗传转化受体,确定体细胞胚萌发阶段的草甘磷（PPT）选择压力为1.4mg/L,头孢霉素（Cef）的除菌浓度为350mg/L,最佳的遗传转化体系为:预培养4d+侵染菌液OD₆₀₀值0.5+侵染25min+共培养3d（阿魏酸150mg/L）+延迟筛选2周。3.转化植株的PCR检测:经体细胞胚再生途径共得到26株抗性植株,以唐菖蒲总DNA为模版,CBFl基囚两端序列合成引物,对抗性植株进行PCR检测有3株呈阳性,阳性率为11.6%。