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目的:研究米非司酮(Mifepristone,MIF)、紫杉醇(TAX)及两者合用在体外对人宫颈腺癌 Hela细胞和人宫颈鳞癌 SiHa细胞增殖影响,并探讨其作用机制,以期发现一种通过诱导细胞凋亡来抑制宫颈癌细胞生长的新的联合用药,为扩大米非司酮化疗增敏的用药奠定科学的理论基础。 方法:取对数生长期的人宫颈癌Hela细胞、SiHa细胞,以单药及联合用药处理后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖活性;流式细胞仪(flow cytometry, FCM)分析药物对人宫颈癌Hela细胞、SiHa细胞的周期影响;RT-PCR法检测用药处理后对人宫颈癌Hela细胞、SiHa细胞中HPV E6、VEGF、COX-2 mRNA表达的变化;免疫印迹(Western blot)方法检测用药处理前后人宫颈癌Hela细胞、SiHa细胞的HPV E6、VEGF、COX-2蛋白表达的变化。 结果:1)MTT法结果显示,发现不同浓度紫杉醇对 HeLa细胞、SiHa细胞增殖均有抑制作用(P<0.01),具有量效和时效依赖性;MIF单药结果显示24h,48h对HeLa细胞溶媒组、MIF组(2.5、5μg/mL)与空白对照组比较,对 HeLa细胞增殖抑制率影响无统计学意义(P>0.05),当 MIF浓度大于10μg/mL时对 HeLa细胞增殖抑制率影响有统计学意义(P<0.05),具有量效和时效依赖性;不同浓度 MIF对 SiHa细胞具有明显的增殖抑制作用(P<0.05);MIF联合紫杉醇可增强其对 HeLa细胞、SiHa细胞的增殖抑制作用(P<0.01);2)流式细胞术结果显示,单用及联合用药使 HeLa细胞、SiHa细胞 G0/G1期所占比例增加,S期比例减少,使周期主要阻滞在 G0/G1期,从而显著抑制HeLa细胞、SiHa细胞的增殖;3)RT-PCR结果显示,单用及联合用药处理HeLa细胞、SiHa细胞后使 HPV-E6、VEGF、COX-2 mRNA的表达水平下降;4) Western blot检测显示,单用及联合应用均能使 HPV-E6、VEGF、COX-2蛋白表达下调,呈浓度依赖性,且以联合应用更为显著。 结论:1)首次应用米非司酮联合紫杉醇作用于不同宫颈癌细胞,求证了米非司酮的化疗增敏作用。2)米非司酮可以抑制宫颈癌 HeLa细胞、SiHa细胞的体外增殖作用以及阻滞细胞周期,并呈一定时间和浓度的依赖性。3)米非司酮对 HeLa细胞、SiHa细胞增殖抑制和化疗增敏作用与下调 HPV16-E6、VEGF、COX-2蛋白表达有关。