目的:通过探讨CARMA3基因调控胶质瘤细胞增殖和凋亡的分子机制,以探索CARMA3基因作为胶质瘤潜在治疗靶点的可能性。方法:(1)手术获取胶质瘤组织和瘤旁组织标本,RT-q PCR检测肿瘤组织和瘤旁组织CARMA3基因表达。(2)采用U251胶质瘤细胞系,根据genebank的CARMA3基因序列,设计合成并筛选出干扰效率最高的CARMA3 si RNA干扰序列。(3)分别设置空白对照组、无义序列组(阴性对照组)和CARMA3 si RNA组,用CCK-8试剂盒检测不同的实验组细胞增殖的变化,运用流式细胞术来检测细胞的凋亡情况,通过Western blot检测与细胞的增殖及凋亡相关的蛋白(Bcl-2、Cyclin D1、P53),以及NF-κB蛋白和CARMA3蛋白的表达情况。(4)通过对空白对照组和CARMA3 si RNA组中NF-κB通路活性的调控,运用CCK-8及流式细胞术检测每组细胞的增殖和凋亡,Western blot检测相关的增殖及凋亡蛋白表达水平。结果:(1)RT-q PCR结果显示,相比较于瘤旁组织,CARMA3基因在胶质瘤组织中的表达显著增强(p<0.01)。(2)设计合成并筛选出干扰效率最高的CARMA3基因的si RNA干扰序列CARMA3 si RNA3。(3)CARMA3 si RNA3干扰序列转染U251胶质瘤细胞后,其P-P65及CARMA3蛋白的表达均较空白对照组和阴性对照组减弱(p<0.01)。细胞的增殖能力较空白对照组和阴性对照组明显减弱(p<0.01)。与空白对照组和阴性对照组相比,其细胞凋亡能力明显增强(p<0.01)。沉默CARMA3基因后,U251胶质瘤细胞Cyclin D1、Bcl-2表达明显减弱,P53表达明显增强(p<0.01)。(4)添加NF-κB促进剂LPS后使CARMA3 si RNA组细胞增殖能力增强(p<0.01)、凋亡减弱(p<0.01),Bcl-2、Cyclin D1表达增强(p<0.01),P53表达减弱(p<0.01)。空白组添加NF-κB拮抗剂PS-341后,细胞增殖能力减弱(p<0.01),凋亡增强(p<0.05),Bcl-2、Cyclin D1表达减弱(p<0.01),P53表达增强(p<0.01)。结论:用CARMA3基因干扰序列转染U251胶质瘤细胞后,CARMA3 m RNA和CARMA3蛋白的表达显著下调。CARMA3 si RNA通过调控NF-κB通路能有效的诱导U251胶质瘤细胞的凋亡。本研究为CARMA3基因作为胶质瘤潜在治疗靶点,以及沉默CARMA3基因可能成为治疗胶质瘤的一种有效手段提供了实验支持。