海藻糖缓解草甘膦致鸡肝损伤的应用研究

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草甘膦(Glyphosate,Gly)是农业生产中使用最广泛的除草剂之一,其大量应用对土壤、水体和农作物造成严重污染。残存的草甘膦通过食物链进入动物体内,对机体多组织器官造成严重损伤。流行病学调查显示,肝脏是草甘膦毒性损伤的重要靶器官之一,长期暴露草甘膦可诱导氧化应激与炎症的发生,损伤肝脏功能。海藻糖(Trehalose,Tre)是一种天然的非还原性二糖,已证实在多种化学毒物致肝损伤中具有显著保护效应。目前,生产中缺乏海藻糖对草甘膦诱导家禽肝损伤保护效应的相关研究。本论文建立鸡草甘膦慢性中毒的动物模型,探讨日粮中添加海藻糖对草甘膦致鸡肝脏损伤的保护效应及可能的作用机制。本试验将60只海兰褐公鸡随机分成3组(n=20只):对照组(Cont组)、草甘膦组(Gly组)、海藻糖+草甘膦组(Tre+Gly组)。各组的处理方式如下:Cont组饲喂全价饲料;Gly组在每千克全价饲料中添加200 mg Gly;Tre+Gly组在每千克全价饲料中添加200 mg草甘膦和5 g海藻糖。三组动物均自由采食和饮水,饲喂4个月后处死,采集脏器与血清进行相关指标检测。试验结果如下:(1)试验期间各组鸡体重无显著差异。(2)采用气质联用法(GC-MS)检测血清和肝组织中草甘膦含量,发现草甘膦在鸡肝脏和血清中均有残留,海藻糖能显著降低血清和肝脏中草甘膦的残留。(3)检测肝细胞损伤标志酶(AST和ALT)活性和肝脏组织病理学变化,发现海藻糖显著降低草甘膦导致的AST和ALT活性增强,并显著缓解草甘膦导致的肝脏病理学损伤。(4)检测血清与肝脏的脂代谢指标,发现海藻糖显著缓解草甘膦导致的血清和肝组织中TG、TC、HDL-C和LDL-C水平异常,并减少肝脏脂肪沉积,表明海藻糖可缓解草甘膦诱导的鸡肝脏脂代谢紊乱。(5)检测血清中氧化应激标志物水平(MDA、T-AOC、SOD、CAT和GSH-PX),发现海藻糖可显著下调草甘膦诱导的血清MDA水平上升,显著上调草甘膦抑制的血清抗氧化酶水平。(6)检测Nrf2-Keap1信号通路关键基因和蛋白表达水平变化,结果显示海藻糖显著上调抗氧化基因(HO-1和NQO1)及蛋白(SOD2和CAT)表达水平,表明海藻糖可缓解草甘膦导致的Nrf2-Keap1通路抑制,显著提高机体抗氧化能力,缓解草甘膦诱导的氧化应激。(7)采用蛋白免疫印迹技术检测NLRP3通路的关键蛋白水平(NLRP3、Caspase1和IL-1β),发现海藻糖可抑制草甘膦诱导的NLRP3通路激活,下调NLRP3、Caspase1和IL-1β蛋白表达水平,缓解肝脏炎症。综上所述,草甘膦可在家禽肝脏中残留,并诱导肝脏脂质代谢紊乱、氧化应激和炎症引起肝脏损伤。添加海藻糖可降低草甘膦在鸡肝脏和血清中的残留水平,改善草甘膦诱导的肝脏脂质代谢紊乱;海藻糖可激活Nrf2-Keap1信号通路缓解草甘膦诱导的肝脏氧化应激;海藻糖可抑制NLRP3信号通路缓解草甘膦诱导的肝脏炎症反应。上述结论表明海藻糖对草甘膦诱导的家禽肝损伤具有良好的保护效应,为海藻糖在畜禽养殖领域的应用提供理论依据。
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