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半夏Pinellia ternata(Thunb.)Breit.是天南星科多年生草本植物，以块茎入药，是传统的中药材，为广布物种，在我国很多地区均有种植。半夏含有多种化学成分，蛋白质和生物碱为其药理作用的主要成分之一。本试验通过组织培养的方法建立愈伤组织颗粒悬浮培养体系，对半夏悬浮培养细胞进行不同方式的处理，例如高温胁迫、外源添加茉莉酸甲酯和水杨酸，研究不同方式处理对半夏悬浮细胞中总蛋白质、总生物碱等有效成分及相关酶活性的影响。主要研究结果如下： 1.取生长旺盛，叶柄粗壮的无菌半夏试管苗，将其叶柄剪成小段(1-1.5cm)置于诱导培养基中（MS+2.0mgL-1 6-BA+2.0mgL-1 2,4-D+2.0mgL-1 KT+6.5gL-1琼脂+30gL-1蔗糖，pH6.0），培养20d左右可诱导出大量愈伤组织。 2.将愈伤组织继代培养3-5次，挑取疏松的、生长旺盛的半夏愈伤组织，将其置于液体悬浮培养基中(MS+0.5mgL-1 6-BA+1.0mgL-1 2,4-D+300mgL-1 CH+30gL-1蔗糖，pH6.0)培养，建立稳定的半夏悬浮细胞培养体系。将其经低温同步化（8℃低温条件下，处理24h，25℃恢复36h）后，转入摇床培养。 3.当半夏悬浮培养细胞培养至生长对数期(9d)，将其分成两组，对照组正常培养，试验组35℃高温胁迫培养，每隔5 d取材测总蛋白和生物碱含量。分别采用酸性染料比色法和Tris-HCl缓冲液提取法测量半夏细胞中总生物碱和蛋白含量。研究发现试验组半夏悬浮培养细胞的干重和总蛋白的含量均明显低于对照组，说明高温对半夏悬浮细胞的生长及悬浮细胞中总蛋白的含量均具有抑制作用。在35℃高温培养的20d中，试验组生物碱含量大多高于对照组，说明在一定程度范围内，高温处理对半夏悬浮细胞中生物碱的含量具有相对的促进作用，且高温胁迫5d时生物碱含量达到最大值，为139.42μg0.1g-1(干粉)。 4.同上面方法一样，当半夏悬浮培养细胞生长到对数期（9d）分成两组，对照组正常培养，同时试验组分别外源添加50μmolL-1、100μmolL-1、150μmolL-1、200μmolL-1的MeJA，研究发现外源MeJA对半夏悬浮培养细胞总生物量的积累存在一定的抑制作用，此外，对其生长代谢周期还有相应的延缓作用。试验组的半夏悬浮培养细胞，外源添加MeJA浓度为150μmolL-1、处理时间为15 d时生物碱和总蛋白含量均达到最高值。 5.在半夏悬浮细胞生长的对数期，分别添加50μmolL-1，100μmolL-1，150μmolL-1，200μmolL-1 SA至试验组的半夏悬浮细胞中，每隔5d，取半夏悬浮细胞材料，分别测对照组和试验组干重、总蛋白及总生物碱含量。研究发现添加SA的试验组，浓度为150μmolL-1、处理15d时总蛋白含量最高，但是生物碱含量达到最高的组合为50μmolL-1 SA、处理15d。 6.同时对上述添加外源MeJA和SA的半夏悬浮培养细胞中的相关酶的活性进行测定，研究发现IMP脱氢酶和sAMP合成酶均与悬浮细胞合成相关代谢产物有着密不可分的联系。当用不同方式处理过后，悬浮细胞中可溶性蛋白含量有一定的增加，同时两种同生物碱代谢相关的酶与对照组相比均呈一定幅度的偏高。