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目的:本研究以NUP62作为研究对象,旨在检测其在胃癌和癌旁组织及各胃癌细胞系中的表达变化,探索NUP62在胃癌发生发展中的作用机制,希望为胃癌的研究提供新的理论和研究基础,并且为胃癌诊断治疗及预后提供新的靶点。方法:1、运用GCBI数据库检测目的基因在胃癌组织与相应癌旁组织中mRNA表达差异,运用Kaplan-Meier分析其在胃癌中表达量与患者预后的关系;2、免疫组织化学技术检测胃癌组织及其相应癌旁组织中目的蛋白的表达差异;3、Western blot技术检测目的蛋白在各胃癌细胞系中表达差异;4、使用细胞瞬时转染技术,将目的基因过表达质粒(pcDNA-NUP62)转至HGC-27细胞内,Western blot验证转染效率;运用RNA干扰(RNAi)技术抑制其在SGC-7901细胞中的表达,并用Western blot评价敲除效果;5、平板克隆增殖实验、transwell迁移实验及划痕愈合实验评价目的蛋白对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响;6、Western blot检测目的蛋白对胃癌细胞增殖迁移及相关AKT、β-catenin和TGF-β通路的影响;结果:1、数据库分析显示胃癌组织中目的基因表达量显著高于其相应癌旁组织;Kaplan-Meier分析显示高表达目的基因的胃癌患者OS和PFS均降低。2、免疫组化结果显示NUP62在胃癌细胞胞核中高表达,在癌旁组织中低表达;Western blot结果显示在多数胃癌细胞中,NUP62表达均高于正常胃黏膜上皮细胞,该结果与数据库结果相符。3、将过表达质粒(pcDNA-NUP62)转染至HGC细胞内,Western blot结果显示目的基因过表达成功;将siRNA转染至SGC-7901细胞内,Western blot结果显示成功将目的基因沉默。4、平板克隆增殖实验、Transwell迁移实验及划痕愈合实验结果表明,在SGC-7901细胞中沉默目的基因后,细胞增殖和迁移能力明显被抑制。进一步Western blot结果显示,E-cadherin表达上升,N-cadherin、Snail表达降低,抑制EMT发生,Timp2表达升高,MMP2及MMP9表达降低,抑制胃癌细胞的侵袭转移。同时PCNA、c-myc和CyclinD1表达降低,胃癌细胞的增殖能力被抑制。在HGC-27细胞过表达目的基因后,E-cadherin表达降低,N-cadherin、Snail表达升高,Timp1表达降低,MMP2、MMP9表达升高,促进胃癌细胞的侵袭转移;PCNA、c-myc和CyclinD1表达均升高,促进胃癌细胞的生长。5、PI3K/AKT通路中,在HGC-27细胞中过表达目的基因后,Western blot结果显示AKT、p-AKT表达上升;当目的基因在SGC-7901细胞中沉默后,AKT和p-AKT表达下降。6、β-catenin通路中,在HGC-27细胞中过表达目的基因后,Western blot结果显示β-catenin、GSK3β和p-GSK3β表达均升高;在SGC-7901细胞中沉默目的基因时,Western blot结果显示β-catenin、GSK3β和p-GSK3β表达均降低。7、TGF-β通路中,HGC-27细胞中目的基因表达上调时,Western blot验证TGF-β、SMAD2/3和p-SMAD2/3表达上升;在SGC-7901细胞中沉默目的基因后,TGF-β、SMAD2/3和p-SMAD2/3表达均下降。结论:NUP62参与胃癌的发生发展过程,并通过调控PI3K/AKT、β-catenin和TGF-β信号通路来诱导胃癌细胞EMT的发生,促进胃癌细胞的增殖与迁移。NUP62可能成为一个新的临床胃癌诊断指标,为胃癌的诊治提供新的理论依据。