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本文以变性葵粕为实验对象,研究变性葵粕蛋白的不同提取工艺和小分子多肽的生物酶水解技术,同时,通过SDS-PAGE凝胶电泳技术分析葵粕蛋白与多肽的分子质量分布情况;通过动物实验研究葵粕多肽的皮肤保湿及抗光老化功能。结果表明: 1、首先以高温变性的葵粕为原料,采用正交实验方法确定传统的碱溶酸沉(JR)工艺和盐提(YT)工艺制备葵粕分离蛋白的最佳提取条件。前者的最佳提取条件为:料液比为1∶14,提取温度为55℃,pH为8.0;后者的最佳提取条件为:料液比为1∶10,提取温度为55℃,pH为7.5。 2、重点研究了盐提工艺提取的葵粕分离蛋白的结构及物理特性,结果表明:葵粕分离蛋白主要是以α-螺旋结构为主,相对分子质量主要集中在50-14KDa之间;氨基酸种类齐全,比例平衡,富含人体所需的8种必需氨基酸,其含量为26.3%,EAAI(必需氨基酸指数)为0.87,尽管赖氨酸为第一限制性氨基酸,但葵粕蛋白仍是较优质的植物蛋白资源。 3、通过蛋白酶筛选及单因素试验,确定采用2709碱性蛋白酶和酸性蛋白酶两步水解的工艺制备葵粕多肽。最佳工艺条件下制备的多肽经过Tricine-SDS-PAGE电泳及凝胶层析法分析表明:碱性蛋白酶一步水解后,分子质量在6200-15000Da之间的多肽占有较大的比例,而分子质量低于3400Da的小分子比例较少;经过胃蛋白酶第二步水解并超滤后,6500-1355Da的多肽分子量占到45.41%,低于1355Da的多肽达到52.17%,而6500Da以上的多肽只有2.42%,达到了功能性多肽样品的要求。 4、皮肤保湿试验发现,浓度为3%的多肽溶液具有较好的保湿作用。在光老化小鼠的皮肤上涂抹800mg/kg·bw·d葵粕多肽,可显著增加皮肤组织中MDA和HYP的含量(p<0.05),表明葵粕多肽对紫外线引起的皮肤光老化具有显著的保护作用,与Vc的抗光老化作用处于同一水平,为葵粕多肽在化妆品和保健品领域的应用提供了理论依据。