论文部分内容阅读
研究背景: Graves病（Graves’disease，GD）为一器官特异性的自身免疫性疾病，文献报道中国人的发病率为1.2％，多发于青壮年（20~50岁），严重危害人类健康和劳动能力。GD的主要治疗手段为抗甲状腺药物（Anti-thyroid Drugs，ATDs），但由于不是针对病因和发病机制，所以复发率高，而且副作用也较大。目前GD的发病机制尚不太清楚，一般认为本病是在遗传因素与环境因素相互作用下发生的器官特异性自身免疫性疾病，其主要环节为自身免疫功能紊乱诱导病人体内产生针对位于甲状腺滤泡细胞表面的促甲状腺激素受体（Thyroid Stimulating Hormone Receptor，TSHR）的抗体即TSHR抗体（TSH Receptor Antibody，TRAb），导致甲状腺肿大和过量甲状腺激素的产生。GD属于多基因遗传性疾病，而且多数基因可能只是发挥微小基因效应，这就意味着可能有许多基因都参与了GD的发病。因此需要不断寻找新的与GD发病有关的基因。白介素21（Interleukin21，IL-21）是一种多效性的细胞因子，可连接先天和适应性免疫反应，有报道其在GD及其它多种自身免疫性疾病中发挥关键作用。本文旨在对中国广东人群Graves病 （Graves’disease，GD）与IL-21基因rs907715基因多态性的相关性进行研究，为阐明 IL-21基因参与Graves病及其临床特征的发生发展提供科学依据。 研究目的: 1.探讨GD患者血清中IL-21水平的变化； 2.研究IL-21/rs907715基因单链核苷酸多态性在中国广东人群的频率分布；3.探索IL-21/rs907715基因单链核苷酸多态性与GD发病风险与临床特征的关系。 研究方法: 研究对象: 211例GD患者（男性70例，女性141例，年龄26-46岁，平均年龄38.5±6.7岁）和212例无GD及其它自身免疫性疾病家族史的正常对照（男性70例，女性142例，年龄33-50岁，平均年龄41.1±7.2岁）为研究对象。所有研究对象均无亲属关系。 基因分型: 提取研究对象外周全血基因组DNA，通过DNA测序直接检测IL-21/rs907715基因单链核苷酸多态性。 统计学分析: 以SPSS20.0软件包进行统计分析，基因型及等位基因频率在病例组与对照组间比较采用卡方检验，显著性水准为P<0.05。 结果: 与正常对照相比，GD患者的血清FT3、FT4、TRAb以及IL-21水平显著升高，血清TSH水平明显降低，差异均有统计学意义（P<0.01）。通过PCR直接测序的方法对IL-21基因进行测序分析，结果显示GD患者的IL-21/rs907715基因GG基因型频率显著高于对照组（35.1% vs.23.0%,2?=7.33,P=6.7×10-3），AA基因型频率显著低于正常对照组（16.6% vs.34.0%,2?=16.89,P=4.0×10-5）。GD患者的G等位基因频率显著高于对照组（59.2 vs.44.6%,2?=18.22,P=2.0×10-5），A等位基因频率（40.8%）显著低于对照组（40.8% vs.55.4%,2?=16.33,P=1.7×10-5）。将IL-21/rs907715基因多态性与患者的临床特征进行相关性分析。 结果显示: IL-21/rs907715基因多态性与患者发病年龄、甲状腺肿大小、家族史以及突眼症状无相关性，而与患者复发史存在相关性。有复发史GD患者的GG基因型频率显著高于无复发史的GD病人（64.7% vs.32.2%,2?=18.69,P=1.8×10-5）；GG基因型频率在有复发史（?2=25.59,P=2.8×10-6）和无复发史（?2=13.91,P=9.5×10-4）的GD患者均高于对照组。有复发史GD患者的G等位基因频率显著高于无复发史的GD患者（77.9% vs.57.3%,2?=16.17,P=1.6×10-5）；而有复发史GD患者的A等位基因频率显著低于无复发史的GD患者（22.1% vs.55.4%,2?=16.33,P=1.7×10-5）；G等位基因频率在有复发史（?2=26.10,P=1.0×10-6）和无复发史（?2=12.58，P=3.9×10-4）的GD患者均高于对照组；A等位基因频率在有复发史（?2=21.26,P=0.8×10-6）和无复发史（?2=9.89，P=1.9×10-4）的GD患者均低于对照组。 结论: 1.GD患者血清IL-21水平显著高于正常对照，提示IL-21可能与GD的发病有关。 2.GD患者的GG基因型频率和G等位基因频率均显著高于正常对照，提示GG基因型和G等位基因携带者GD发病风险增加；AA基因型及A等位基因频率均显著低于正常对照，提示AA基因型和A等位基因携带者GD发病风险降低。 3.GG基因型频率和G等位基因频率在有复发史的GD患者中要显著高于无复发史的GD患者，而且在两组病人均显著高于正常对照，提示GG基因型和G等位基因携带者不但GD发病风险增加，而且GD发病后复发风险也增加。 4.AA基因型和A等位基因频率在有复发史的GD患者要显著低于无复发史的GD患者，而且在两组患者均显著低于正常对照，提示AA基因型和A等位基因携带者不但GD发病风险降低，而且GD发病后复发风险也降低。 5.IL-21/rs907715基因多态性与GD发病年龄、甲状腺肿、突眼及家族史无相关关系。