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背景： 熊果酸（Ursolic acid，UA）和齐墩果酸（Oleanolic acid，OA）互为同分异构体，具有抗炎保肝的药理作用。在急性肝损伤过程中，肝细胞受到损害，胆汁排泄障碍，人体中胆汁酸主要通过Ⅱ相代谢酶UGT2B7葡萄糖醛酸化代谢，由胆盐输出泵（BSEP）和多药耐药相关蛋白（MRP）等外排转运体排泄。UA和OA可通过激活核受体Nrf2，调控下游抗氧化因子等基因的表达，最终达到抗氧化、护肝等作用。那么UA和OA的保肝机制是否是通过激活Nrf2调控Ⅱ相代谢酶UGT2B7和胆酸转运蛋白BSEP和MRP2呢？值得探讨。 目的： 研究UA和OA对HepG2细胞中Nrf2、UGT2B7、BSEP和MRP2的表达影响，及对Nrf2-UGT2B7/BSEP/MRP2调控通路的影响机制，为UA和OA的保肝机制提供更多理论依据。 方法： 1.在HepG2细胞中，通过Rt-qPCR、Western bloting等技术手段，考察不同时间不同浓度的UA和OA对Nrf2、UGT2B7、BSEP和MRP2的mRNA和蛋白表达影响。 2.通过瞬时共转染构建沉默Nrf2的HepG2细胞模型，研究UA和OA对Nrf2、UGT2B7、BSEP和MRP2的mRNA和蛋白表达影响。 3.通过构建质粒、瞬时共转染及双荧光素酶报告基因试验，探究UA和OA对Nrf2-UGT2B7/BSEP/MRP2调控通路的作用机制。 结果： 1.UA/OA对HepG2细胞中UGT2B7和BSEP的调控有时间相关性，且浓度为32μM的UA和OA作用HepG2细胞48h后，Nrf2、UGT2B7、BSEP和MRP2的mRNA和蛋白表达的上调作用最显著。 （1）UA作用24h后，显著性上调Nrf2和MRP2的mRNA和蛋白表达，对BSEP和UGT2B7的mRNA和蛋白表达基本无影响。 （2） OA作用24h后，显著性上调Nrf2、UGT2B7、BSEP和MRP2的mRNA表达，同时显著性上调Nrf2和MRP2的蛋白表达，对UGT2B7和BSEP的蛋白表达无影响。 （3）UA延长作用至48h后，显著性上调Nrf2、UGT2B7、BSEP和MRP2 mRNA和蛋白的表达。 （4）OA延长作用至48h后，显著性上调Nrf2、UGT2B7、BSEP和MRP2 mRNA和蛋白的表达。 2.在沉默Nrf2的HepG2细胞模型中UA和OA对UGT2B7、BSEP mRNA和蛋白表达的上调作用与HepG2细胞中的表达无统计学差异，但对 MRP2 mRNA和蛋白表达的上调作用均显著减弱。 3.UA和OA均能显著诱导MRP2报告基因酶活性。 结论： 1.UA和OA作用HepG2细胞，Nrf2的mRNA和蛋白表达的上调作用最显著，同时UGT2B7、BSEP和MRP2的mRNA和蛋白表达也能显著上调。 2.在沉默Nrf2的HepG2细胞模型中，UA和OA对MRP2 mRNA和蛋白的上调作用显著减弱，但对UGT2B7和BSEP的上调作用基本无影响，提示MRP2的表达受Nrf2的调节，UA和OA体内促胆汁酸的排泄可能是通过激活Nrf2上调MRP2的表达。 3.双荧光素酶报告基因试验证实UA和OA能通过激活Nrf2上调MRP2表达。