Triton X-100制备去细胞神经移植体的实验研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:by_huang
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目的:周围神经损伤后造成的较长节段缺损的修复一直是临床治疗中的难题。自体神经移植是临床上治疗周围神经缺损的最基本、最理想的方法,但对长距离缺损或神经丛的损伤,往往因没有充足的自体神经来源而使治疗陷于困境,且切取后有供区麻木、疤痕、神经瘤等并发症。同种异体神经虽来源充足但免疫排斥反应又限制了异体神经的临床应用。用组织工程学的方法来构建移植体受到众多学者的关注。最近发展的化学萃取方法可有效清除神经中的雪旺细胞及髓鞘,从而减轻异体神经的抗原性,为临床寻找理想的自体神经移植替代物开辟了新的途径。本实验采用Triton X-100(聚氧乙烯辛烷基酚)去除异体周围神经中的雪旺细胞和髓鞘,制取天然神经细胞外基质,构建组织工程化神经移植体。为临床修复较长节段周围神经缺损提供实验依据。方法:健康新西兰大耳白兔30 只,分别自梨状肌下缘水平以远切取10 mm双侧坐骨神经60根,随机分为6组(A、B、C、D、E、F),其中A(12h 组)、B(24h 组)、C(48h 组)、D(96h 组)、E(1 周组)用于化学萃取,F(新鲜神经)为对照组。神经萃取前先在手术显微镜下剪去表面的脂肪组织和部分神经外膜,然后置4oC 蒸馏水中静置6 小时,以使细胞和髓鞘在低渗液体中膨胀、细胞被胀破,使之易于Triton X-100 的渗透;再将神经放入3%的Triton X-100 水溶液中分别静置12h,然后置于蒸馏水中震荡、漂洗6h,以使溶于水
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