本实验室之前合成的Dmt-Pro-1-Nal-NH2和Dmt-Pro-Tmp-Tmp-NH2是具有μ受体激动/δ受体拮抗双重活性且不激活β-抑制蛋白信号通路的阿片肽。药理学测试结果显示,具有这种性质的阿片分子具有低耐受性、低依赖性、低呼吸抑制及低肠胃不良反应。为了对以上两个化合物进行动物体内活性研究,我们需要大量地合成这两个化合物。为此,论文的第一部分,我通过液相肽合成法合成了各1克上述二肽。初步的药理学研究表明,Dmt-Pro-Tmp-Tmp-NH2的镇痛活性是吗啡的四倍。[Dmt1]DALDA(H-Dmt-D-Arg-Phe-Lys-NH2)是源自于皮啡肽的镇痛药物,此化合物具有很高的μ-阿片受体激动活性和选择性,它能够穿透细胞膜,且具有很强的酶解稳定性。[Dmt1]DALDA能够抑制大鼠脊髓突触摄取去甲肾上腺素,也能够促进强啡肽、5-蛋氨酸脑啡肽等物质的释放。这些额外的功能和其对μ-阿片受体的强活化作用使[Dmt1]DALDA具有很强的镇痛活性。此外,[Dmt1]DALDA是能够靶向线粒体内膜的抗氧化剂,具有很好的抗慢性疼痛作用。尽管[Dmt1]DALDA是一个很有潜力的镇痛药,但使用过程中仍存在一定的耐受性。之前,我们用苯丙氨酸的类似物代替[Dmt1]DALDA 3位的苯丙氨酸,对其进行了构效关系研究。在此,我们用酪氨酸的类似物替代1位的2,6-二甲基酪氨酸(Dmt)制备[Dmt1]DALDA的类似物,对其进行进一步的构效关系研究,希望提高μ-受体结合活性、选择性以及抗氧化能力。所用酪氨酸类似物有:2,4,6-三甲基-L-酪氨酸(Tmt),2-乙基-6-甲基-L-酪氨酸(Emt),2-异丙基-6-甲基-L-酪氨酸(Imt),2,6-二乙基-L-酪氨酸(Det)。药理学研究显示[Tmt1]DALDA和[Emt1]DALDA显示较强的μ-受体激动活性,[Det1]DALDA显示中等强度的μ-受体激动活性,[Imt1]DALDA对μ受体、δ受体激动活性都很弱。[Dmt1]DALDA是靶向线粒体的抗氧化剂。抗DPPH自由基实验显示,[Tmt1]DALDA、[Emt1]DALDA具有比[Dmt1]DALDA更强的抗氧化能力,表明这两个化合物有望在慢性疼痛治疗中发挥作用。[D mt1,Tmp3]EM-2(Dmt-Pro-Tmp-Phe-NH2)是具有μ受体激动/δ受体拮抗双重活性且不激活β-抑制蛋白信号通路的阿片分子。具有这种性质的阿片分子具有低耐受性、低依赖性、低呼吸抑制作用及低肠胃不良反应。内吗啡肽的酶降解主要是从Pro-Phe/Trp之间的酰胺键断裂开始的。为了提高[Dmt1,Tmp3]EM-2的酶解稳定性,防止二肽基肽酶的水解,我们对2位的脯氨酸进行构效关系研究。以4-羟基脯氨酸为起始原料,合成了顺-4-三氟甲基-L-脯氨酸、顺-4-氟-L-脯氨酸、顺-4-甲基-L-脯氨酸、4-亚甲基-L-脯氨酸4个脯氨酸的衍生物。用这些脯氨酸衍生物和4-羟基脯氨酸通过固相肽合成法合成了 Dmt-Xaa-Tmp-Phe-NH2 5个四肽。同时氟、三氟甲基、甲基等是脂溶性基团,在提高酶解稳定性的同时,我们也期望增强肽的脂溶性,提高通过血脑屏障的能力。同样地,用上述的脯氨酸衍生物对三肽Dmt-Pro-1-Nal-NH2中2位的脯氨酸取代研究,成功合成了 5个三肽化合物:Dmt-(4-CF3)-Pro-1-Nal-NH2、Dmt-(4-F)-Pro-1-Nal-NH2、Dmt-Hyp-1-Nal-NH2、Dmt-(4-CH3)-Pro-1-Nal-NH2、Dmt-(4-(CH2=))-Pro-1-Nal-NH2。初步的药理学表征正在进行中。