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目的:阐明中期因子对肺腺癌A549细胞增殖凋亡的影响,探索寻找肺腺癌新的生物学诊断指标和治疗方法。实验方法:以肺腺癌A549细胞株为研究对象,采用RNA干扰技术抑制MDK基因表达,并根据干扰的MDK基因不同的靶序列,将实验组分为三组(MDKsiRNA-1,MDKsiRNA-2,MDKsiRNA-3组),对照组为无任何处理A549细胞组(Control-A),空载脂质体组(Control-B),阴性siRNA序列组(Control-C),阳性siRNA序列组(Control-D)。采用脂质体法转染MDKsiRNA,MTT法测定各组中细胞增殖率,分别收集各组中肺腺癌A549细胞,用蛋白裂解液裂解细胞,超速离心得胞质蛋白,用Westem blot法测定各组中Caspase-3蛋白表达量。用Caspase-3 Activ ity Assay kit测定Caspase-3的活性。结果:M TT法测定3个靶序列转染组增殖率为:MDKsiRNA-1(17.8±4.7)%,MDKsiRNA-2(12.9±4.6)%,MDKsiRNA-3(13.5±3.9)%,无任何处理A549细胞组Control-A(23.8±2.7)%,而空载脂质体组Control-B(25.3±4.3)%,siRNA阴性对照组(25.2±5.9)%,MDKsiRNA-2和MDKsiRNA-3两个靶序列转染组增殖率明显低于对照组(p＜0.05),而MDKsiRNA-1与对照组无明显差别(p＞0.05),各对照组之间差异无显著性(p＞0.05)。Western blot法测定各组中Caspase-3蛋白表达量,结果各组中Caspase-3蛋白表达量OD值分别为:Control-A(0.03±0.004),Control-C(0.07±0.004),Control-D(0.13±0.007),MDKsiRNA-3(0.40±0.013),MDKsiRNA-2(0.51±0.013),MDKsiRNA-1(0.10±0.019),与对照组比较,MDKsiRNA-2、MDKsiRNA-3两组Caspase-3蛋白表达上调(p＜0.05),MDKsiRNA-1组无明显差别(p＞0.05),采用Caspase-3 Activity Assay kit测定Caspase-3的活性,结果:各转染组及对照组A405 OD值分别为:MKsiRNA-1(0.19±0.004),MDKsiRNA-2(0.45±0.021),MDKsiRNA-3(0.41±0.005),Control-A(0.14±0.003),Control-C(0.15±0.003),与对照组比较,MDKsiRNA-2 MDKsiRNA-3两组Caspase-3活性明显增高(p＜0.05),MKsiRNA-1增高不明显(p＞0.05).结论:1.MDKsiRNA在体外可抑制肺腺癌A549细胞的增殖。2.MDKsiRNA在体外可促进肺腺癌A549细胞Caspase-3蛋白表达增高,活性增加,诱导肺腺癌A549细胞凋亡。3.MDKsiRNA不同靶序列对肺腺癌A549增殖凋亡的作用有区别,可为筛选有效的具有高度特异性的MDKsiRNA,提供实验依据。4.MDKsiRNA有可能成为肺腺癌新的生物学诊断指标及治疗的新靶点。