苦参碱在大鼠同种异体角膜移植手术中对CD4~+CD25~+调节性T细胞的影响

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在角膜移植手术中,受体能够识别进入其体内的“非己”器官并产生免疫排斥反应,移植后的排斥反应是造成角膜移植失败的主要原因。如今,对免疫排斥反应的研究已经成为角膜移植的一个重要方向。目前临床上常用的免疫抑制药物不仅价格昂贵而且毒性大,对机体有着不良反应。由豆科植物苦参的干燥根、植株、果实经有机溶剂提取制成的苦参碱对移植后的急性排斥反应在一定程度上具有免疫抑制的作用,同时苦参碱廉价易得而且毒副作用小,苦参碱的药用价值越来越得到大家的研究。本实验将通过苦参碱对大鼠角膜移植手术后的免疫排斥反应进行研究,探讨苦参碱作为免疫抑制剂作用对CD4+CD25+调节性T细胞的作用机制。本实验以Wistar大鼠作为研究对象,并建立大鼠角膜移植模型,通过对移植后的大鼠给予不同浓度的MT来研究实验大鼠体内CD4+CD25+调节性T细胞的变化。将大鼠随机分为对照组与实验组,在大鼠角膜移植模型建立成功后,对照组腹腔注射生理盐水,实验组分别注射5mg/kg MT、10mg/kg MT、15mg/kg MT和10mg/kg的环孢素A,连续给药7天。根据角膜免疫排斥反应的评分标准,判断角膜移植后植片的生长情况。术后7天采集对照组和实验组大鼠的外周血和脾脏进行流式细胞仪检测。在术后的第7d收集对照组和实验组大鼠的外周血进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。对移植后的植片观察可以发现,实验组角膜植片的浑浊程度、水肿程度和新生血管指数比对照组都要低。流式细胞术检测结果中发现,在术后7天外周血和脾脏中实验组5mg/kg MT大鼠中的CD4+CD25+调节性T细胞的含量比对照组要高。同时通过对大鼠外周血的检测可以发现,实验组的IL-10和TGF-β1的水平比对照组要高。结果可以表明,在角膜移植模型建立后腹腔注射一定浓度的苦参碱能够提高大鼠体内的CD4+CD25+调节性T细胞的含量,并提高体内IL-10和TGF-β1的含量。一定浓度的苦参碱能够抑制移植后机体的免疫排斥反应。
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