分子水平上调控细胞粘附和分离体系的构建

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生物材料科学是介于材料科学与生命科学之间并相互渗透而产生的一个重要边缘学科。生物材料发展与进步的根本源动力是健康的需要。人们对生物材料与生命体相互作用的现象和规律进行了深入研究。目前,生物材料的发展前沿在于生物相容性材料,纳米生物材料,生物矿化材料和仿生智能材料等。本课题采用基底上固定能形成二聚体的一对-螺旋多肽A和B及温敏性高分子构建了一类能在分子水平上精确控制细胞粘附和分离的体系,主要工作有以下内容。运用分子生物学手段设计和构建了多肽Bcys、NcysA、和NcysARGD相应的目的基因及多肽的表达及纯化。由于是基因工程表达产物,这些多肽具有极佳的生物相容性和结构可控性,通过在多肽末端引入半胱氨酸与其它温敏材料连接,赋予分子多重特性。基因工程多肽A与B中-螺旋能通过疏水相互作用形成亮氨酸拉链的二聚体结构,显示了其在形成复杂体系中的应用潜能。采用可逆加成-断裂链转移(RAFT)聚合反应合成了一系列的温敏高分子(mPEG-PNIPAM),通过偶联剂将温敏高分子上的活性基团和多肽Bcys上的半胱氨酸上的巯基形成多肽和高分子的偶联物mPEG-PNIPAM-B。实验结果表明,PNIPAM的温敏效应不因修饰上mPEG和多肽B而消失。最后,通过多肽A和B能形成一对稳定的二聚体结构,在多肽A上引入生物活性配体(RGD作为模型配体),通过多肽B上连接的温敏性高分子和PEG来遮蔽固定在基底上的生物活性配体,通过温敏的高分子开关来调节多肽A上的活性配体和细胞相互接触和分离,从而构建一类在分子水平上调控细胞粘附和分离的温敏体系。这类体系可以很好的适用于其他感兴趣的固定化生物活性配体的动态调控,为智能材料在控制细胞分化、靶向作用等应用领域中提供理论依据。
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