【摘 要】
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背景 铁调素（hepcidin,HEPC）是由肝脏内铁调素抗菌多肽（Hepcidin antimicrobial peptide,HAMP）基因编码产生的一种蛋白多肽,是调控机体铁代谢的主要激素。有研究表明慢性丙型肝炎患者体内铁调素水平高低与应用聚乙二醇干扰素治疗时的疗效相关。然而在感染慢性乙型肝炎病毒的患者体内,血清铁调素水平和聚乙二醇干扰素治疗的关系尚未阐明。本研究旨在探讨慢乙肝患者血清铁调素
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背景 铁调素（hepcidin,HEPC）是由肝脏内铁调素抗菌多肽（Hepcidin antimicrobial peptide,HAMP）基因编码产生的一种蛋白多肽,是调控机体铁代谢的主要激素。有研究表明慢性丙型肝炎患者体内铁调素水平高低与应用聚乙二醇干扰素治疗时的疗效相关。然而在感染慢性乙型肝炎病毒的患者体内,血清铁调素水平和聚乙二醇干扰素治疗的关系尚未阐明。本研究旨在探讨慢乙肝患者血清铁调素水平对聚乙二醇干扰素α（pegylated interferon-a,PEG-IFN-α）治疗慢乙肝抗病毒效应的预测价值及其可能机制。方法 我们纳入47例应用PEG-IFN-α治疗的慢乙肝患者为研究对象,通过酶联免疫吸附实验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测患者血清HEPC水平,分析治疗过程中HEPC水平的动态变化和病人乙肝表面抗原（HBs Ag）、乙肝病毒DNA（HBV DNA）动态变化之间的关系。通过ROC曲线分析PEGIFN-α治疗慢乙肝早期疗程中HEPC水平的变化对PEG-IFN-α抗病毒效应的预测价值。以细胞系Hep G2.2.15细胞为细胞模型,运用实时荧光定量PCR（Reverse transcription quantitative real-time PCR,RT-PCR）技术、细胞免疫荧光染色实验（immunofluorescence cell staining）和蛋白质免疫印迹法（western blotting,WB）检测PEG-IFN-α处理前后细胞内HEPC水平的变化和细胞内抗病毒蛋白水平的变化,初步探讨HEPC水平变化预测PEG-IFN-α治疗慢乙肝抗病毒效应的潜在机制。结果 应用PEG-IFN-α治疗的慢乙肝患者中,HBs Ag下降＞1 log10 IU/m L或HBV DNA下降＞1 log10 IU/m L的患者早期治疗过程中血清HEPC水平均有明显升高。ROC曲线分析得出,HBs Ag下降＞1 log10 IU/m L的慢乙肝患者血清HEPC水平的截断预测值为239pg/ml,敏感性和特异性分别为72.73%、70.97%,HBV DNA下降＞1 log10 IU/m L的慢乙肝患者血清HEPC水平截断值为190.4pg/ml,敏感性和特异性分别为72.73%、60.11%。体外细胞实验中,RT-PCR和细胞免疫荧光的结果均显示应用PEG-IFN-α处理后的Hep G2.2.15细胞内编码HEPC的基因表达水平和蛋白表达量均明显上调;此外,WB结果显示用PEG-IFN-α和HEPC联合处理Hep G2.2.15细胞,细胞内抗病毒蛋白表达量较单一应用PEG-IFN-α时的抗病毒蛋白表达量有明显增加,且用HEPC过表达质粒转染后的Hep G2.2.15细胞中PEG-IFN-α诱导表达的抗病毒蛋白量较HEPC小干扰RNA转染后的Hep G2.2.15细胞高,提示HEPC对PEG-IFNα诱导细胞内抗病毒蛋白的表达有协同作用。结论 应用PEG-IFN-α治疗的慢乙肝早期疗程中血清HEPC水平越高,其HBs Ag和HBV DNA水平下降越明显。高HEPC水平预示着应用PEG-IFN-α治疗慢乙肝时具有更好的抗病毒效应;其机制可能与HEPC可以协同PEG-IFN-α诱导细胞内抗病毒蛋白的表达有关。
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