研究目的:1.研究三叶片对健康人体服用麦芽糖后血糖的影响2.研究三叶片对麦芽糖酶活性的体外抑制特点及抑制类型3.研究三叶片对麦芽糖酶分子二级构象的影响研究方法:1.采用两周期自身交叉对照设计,筛选12名健康受试者,每名受试者将接受2种干预方式,分别为麦芽糖和麦芽糖+三叶片,观察三叶片对健康受试者服用麦芽糖后的血糖影响。2.以麦芽糖为底物,运用酶抑制动力学方法研究三叶片对麦芽糖酶的抑制作用特点和机制,包括:（1）确定实验最适底物浓度、反应时间和酶浓度;（2）不同浓度的三叶片提取物与麦芽糖酶和底物反应,分别计算不同浓度三叶片提取物对麦芽糖酶的抑制率,通过曲线拟合计算三叶片提取物的半数抑制浓度(IC50);（3）三叶片提取物浓度和底物浓度保持不变,改变加入的酶量,绘制酶量-速度图（E-V图）,研究三叶片提取物对麦芽糖酶的抑制作用特点;（4）固定酶量,改变底物浓度,用Lineweave-Burk双倒数法作图,绘制底物浓度-反应速度双倒数抑制曲线（[S]-V双倒数曲线）,分析三叶片对麦芽糖酶的抑制类型。3.运用圆二色谱仪研究不同浓度三叶片在不同反应时间下对麦芽糖酶分子构象的影响。研究结果:1.临床研究（1）相比单独服用麦芽糖,服用麦芽糖+三叶片后受试者的血糖降低,其中45min、60min、90min血糖的降低明显（P<0.05）。（2）受试者服用麦芽糖的血糖-时间变化曲线下面积（AUC）为279.41±111.31,服用麦芽糖+三叶片后的血糖AUC为203.86±61.08,两者间差异具有统计学意义（P<0.05）。2.机制研究实验一酶抑制动力学研究（1）实验最适底物（麦芽糖）浓度、最适酶浓度和时间的选择中,确定麦芽糖浓度0.25mol/L为本实验的底物浓度,最适酶反应浓度为5mg/m L,最适反应时间为12min。（2）三叶片提取物对麦芽糖酶的IC50为（1.64±0.10）×10-2mg/m L。（3）抑制作用的试验中三叶片组和阿卡波糖组均与阴性对照组的抑制曲线相交于原点,均为可逆性抑制剂。（4）抑制类型鉴别的实验中,不同浓度三叶片提取物和阿卡波糖的抑制曲线与阴性对照组相交于y轴,均为竞争性抑制剂。实验二圆二色谱研究随着三叶片浓度和时间的改变,三叶片能使麦芽糖酶分子的光谱强度、峰的位置及形状发生变化,α-螺旋比例增加,最高达47.90%;β-折叠的比例减少,甚至检测不到;β-转角的比例最高增加至24.20%;无规则卷曲的比例变化不明显。研究结论:1.临床研究得出三叶片能降低健康受试者服用麦芽糖后的餐后血糖。2.机制研究显示三叶片可抑制麦芽糖酶活性,抑制类型为可逆的竞争性抑制。3.光谱学研究中三叶片可以改变麦芽糖酶分子的二级结构,使麦芽糖酶失去原本的天然构象而失去活性。4.三叶片可以通过抑制麦芽糖酶的活性来降低血糖,是一种有效的α-糖苷酶抑制剂。