小麦新品系L699抗病基因Pm40介导的抗白粉病防御机制研究

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小麦白粉病是由禾布氏白粉菌小麦专化型(Blumeria graminis f.sp.tritici,Bgt)引起的真菌病害,是小麦生产中普遍发生、为害严重的病害之一。近年来,由于高投入、单一化的种植导致小麦白粉病在各生产区发生加重,严重影响了小麦的产量和品质。每年因为小麦白粉病的发生导致我国小麦减产5-19%,病害发生严重时期减产达30%,造成严重的经济损失。虽然农业生产中防治小麦白粉病的方法有很多,但是就目前而言,选用抗病品种是防治小麦白粉病最经济、有效、环境友好的途径。然而,由于白粉病菌生理小种多,适应范围广、变异快,导致目前我国小麦生产种植面临抗源单一、抗病基因分布不合理和现有的有效抗性基因尚未得到充分的利用等问题,因此,迫切需要对我国现有的小麦材料进行全面了解和深入分析,结合抗性结果对小麦材料进行抗源改良,基因整合,以此推进我国小麦抗性品种的育种进程。近年来选育的一个含有白粉病抗病基因Pm40的小麦栽培新品系L699表现为高抗,丰富了小麦抗白粉品种资源,但国内外对其抗病机制尚无研究报道。本研究以含有抗病基因Pm40的小麦新品系L699为试验材料,以抗病品种NM836和感病品种CN26分别为抗、感对照,通过Bgt接种后,检测比较不同时间点抗病相关防御反应的动态变化情况,以探究Pm40介导的小麦新品系L699对白粉病的抗病机制。通过研究得出如下结果:1、通过对小麦与Bgt互作的细胞学特征的显微观察发现,接菌24~48 h后,抗感病小麦叶片细胞均形成了乳突,随后,Bgt可成功穿透感病品种CN26的乳突,进一步发育形成吸器和二级菌丝,而在抗病材料NM836和L699上,Bgt因无法找到侵入点,附着胞芽管不断伸出,且出现大量分支畸形,NM836和L699与感病品种CN26相比乳突形成率显著增高。Pm40介导的L699细胞反应与抗病品种NM836相似。2、采用DAB和台盼蓝染色法,观察不同小麦品种活性氧(ROS)和过敏性反应(HR)发生情况发现,经Bgt诱导抗病材料NM836和L699的ROS迅速产生,且显著高于CN26;伴随着ROS的产生,三个小麦品种的HR也被诱导,抗病品种HR的水平显著高于CN26;通过对抗氧化物酶类活性分析发现,与CN26相比,NM836和L699体内的CAT和POD在Bgt接种后迅速被激活且水平较高,SOD变化不明显。3、采用q RT-PCR对Bgt接种后抗病基因表达情况进行研究发现,24~48 h后,各个抗病基因的表达水平在不同程度的增加,但L699体内的抗病基因表达水平明显高于CN26和NM836。综上所述,Pm40介导的L699对白粉菌的抗病防御表型在细胞壁相关的乳突形成、ROS产生、抗氧化物酶类活性、HR反应以及抗病相关基因的表达等方面,且与抗病品种NM836相似,与感病品种CN26相比,其抗病反应差异主要表型在反应时间和反应强度上,本研究结果为进一步深入探究小麦与白粉病互作机制提供一定的理论依据。
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