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微藻富含蛋白质、糖类等多种营养成分,在生物炼制、保健食品、动物饲料等方面具有广阔的开发前景。目前包括我国在内的很多国家专注于研究微藻生物质能源,每年用于生物质能源制备得到的藻渣占微藻质量的50%~80%,大量的藻渣急需进一步处理和利用。本实验以小球藻(Chlorella vulgaris)为研究对象,考察分析不同有机溶剂提取油脂后,藻渣中蛋白、碳水化合物、矿物质等相关组分的变化,并在此基础上进一步探讨藻渣作为动物饲料蛋白来源的安全性、耐受范围等问题。同时利用酶解法对提取的藻渣蛋白进行水解,分析不同酶解条件及蛋白酶组合对藻渣蛋白的水解情况,其主要结论如下: (1)选取规模养殖的小球藻作为研究对象。按照国标方法,对小球藻的营养组分进行了测定,结果为:粗脂12.14%,水分5.73%,灰分5.63%,粗蛋白54.70%,碳水化合物19.96%,单宁0.54%。本实验采用6种不同的有机溶剂萃取体系(甲醇/正己烷/乙醚,甲醇/正己烷,乙醇/乙醚,乙醇/正己烷,二氯甲烷/甲醇,正己烷)对小球藻进行提油,考察不同体系对藻渣主要营养组分及主要嫌忌成分单宁的影响。结果表明:采用二氯甲烷/甲醇这一萃取体系对小球藻进行提油,油脂得率为9.96%,得到的藻渣中粗蛋白含量最高为64.02%,单宁含量为0.254%。综合提油率、藻渣蛋白含量及单宁含量的测定结果,实验选择选择二氯甲烷/甲醇这一油脂萃取体系提油,并对提油后的藻渣进行后续利用的研究。 (2)以1日龄ROS308快速生长型肉鸡为研究对象,分别饲喂正常肉鸡饲料对照组A、藻渣替代组B、C、D、E(替代比分别为30%、40%、50%、100%,以豆粕蛋白计),饲喂35天,通过料肉比、血液常规、生化检查及器官指数测定、组织病理学检查等对实验结果进行评价。结果显示:所有藻渣替代组对肉鸡生长的安全性均没有影响;藻渣蛋白替代比不高于50%时,对饲料适口性没有影响,替代比为40%的试验组C的料肉比最低为49.24,显著低于A、E组(P<0.05),因此藻渣可以部分代替豆粕作为肉鸡饲料的蛋白来源,并且当替代比为40%时,添加藻渣作为肉鸡饲料蛋白来源会获得较高的饲料利用率。 (3)对藻渣蛋白酶解工艺进行优化,发现采用菠萝蛋白酶和胰蛋白酶且两种酶的比例为1∶2的复合酶水解藻渣蛋白时,水解度较高,并且均高于采用单一蛋白酶水解小球藻藻渣蛋白的水解度。通过Box-Behnken响应面设计得到复合蛋白酶水解小球藻藻渣蛋白的最优条件:在水解pH为7.05、酶占底物浓度3.95%,水解温度为60.5℃的条件下,复合酶水解藻渣蛋白的实际水解度为22.02%。