BMP12诱导骨髓间充质干细胞分化为腱细胞

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骨髓间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是骨髓基质系统中一种具有多向分化潜能的干细胞,它可以向多种结缔组织及部分来源于外胚层的组织分化,形成骨、软骨、骨骼肌、腱、韧带、真皮、脂肪、骨髓基质和神经,可以作为组织工程中构建这些组织的种子细胞。 为了寻找肌腱组织工程中理想的种子细胞,本研究建立了分离、培养、纯化人胚胎MSCs的方法,对其形态学进行了系统的观察,对其生物学特性、端粒酶活性、碱性磷酸酶活性及表面抗原和细胞基质中的蛋白属性进行了检测并证实了培养的细胞是处于未分化状态的MSCs,裸鼠体内实验证明培养的MSCs具有多向分化能力。利用RT-PCR法,从人足月胎盘克隆了腱形态发生中重要的调节因子——骨形态发生蛋白12(Bone Morphogenetic Protein 12,BMP12)基因完整编码区的cDNA,正向连接至真核细胞表达载体pTARGETTM的多克隆位点,脂质体介导pT(ARGE)TTM-hBMP12转染入MSCs中,诱导其定向分化,与亲本MSCs相比,从形态学、mRNA水平、蛋白水平证实其表型特征已发生改变,具有腱细胞的性质,而且细胞周期分析表明经转染后的细胞仍具有较强的增殖能力。 本研究建立了从分离培养人骨髓MSCs到定向诱导分化为腱细胞的方法,使其可以作为种子细胞用于肌腱组织工程,还为骨髓MSCs自体移植、修复治疗肌腱损伤的临床应用提供扎实的理论基础。
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