miRNA-10b在胰腺癌细胞系PANC-1中的表达及其对PANC-1生物学功能的影响

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目的:研究人miRNA-10b(Has-microRNA-10b,微小RNA-10b)在胰腺癌细胞系PANC-1中的表达情况及其对胰腺癌细胞系PANC-1生物学功能的影响。方法:采用实时荧光定量PCR检测miRNA-10b在胰腺癌细胞系PANC-1中的表达情况。通过化学合成成熟型人miRNA-10b模拟体,瞬时转染至PANC-1细胞中,实时荧光定量PCR检测进行鉴定,检测miRNA-10b的表达量。采用MTT法检测miRNA-10b对PANC-1细胞增殖的影响,流式细胞仪检测对PANC-1细胞凋亡的影响,Transwell小室检测对PANC-1细胞的侵袭功能的影响,细胞划痕实验检测对PANC-1细胞迁移功能的影响,以探讨表达上调的miRNA-10b对胰腺癌细胞系PANC-1所起的生物学作用。结果:实时荧光定量PCR显示miRNA-10b在PANC-1中相对表达量为(3.606±0.423),(P<0.01)。瞬时转染miRNA-10b至PANC-1后,miRNA-10b转染组中miRNA-10b的表达量为空白对照组(4.392±0.176)倍,(P<0.01),阴性对照组为空白对照组(1.175±0.110)倍,(P>0.05)。MTT法检测转染后24h、48h、72h和96h时间点三组细胞的增值活性无明显差别(P>0.05)。流式细胞仪检测转染后miRNA-10b转染组凋亡率为(12.31±3.10)%,阴性对照组和空白对照组细胞凋亡率分别为(13.76±3.13)%、(16.28±4.19)%,(P>0.05)。Transwell小室侵袭实验结果显示miRNA-10b转染组PANC-1细胞穿膜数为(71.3±5.3)个,阴性对照组(30.1±3.4)个,空白对照组(29.2±5.2)个,miRNA-10b转染组穿膜细胞数明显多于对照组(P<0.01)。细胞划痕实验结果显示24h和48h后miRNA-10b转染组划痕间距逐渐缩小,而阴性对照和空白对照组两组划痕间距均无明显变化,且两组之间无明显差别。结论:miRNA-10b在胰腺癌细胞系PANC-1中明显高表达。化学合成的成熟型miRNA-10b可以转染入PANC-1细胞,能显著提高转染细胞中miRNA-10b的表达量,并有效发挥上调作用。转染miRNA-10b后对PANC-1细胞的体外侵袭和迁移能力有显著的促进作用,但对PANC-1细胞的增殖和早期凋亡无明显影响。
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