论文部分内容阅读
黑茶是利用发酵的方式制成的一种特殊茶,属于后发酵茶,是中国六大茶类之一。制茶工艺主要包括毛茶拼配、拼堆筛分、汽蒸渥堆、压制定型、“发花”干燥、成品包装等工序。按地域可分为湖南黑茶(安化黑茶)、四川藏茶(康砖茶)、云南黑茶(普洱茶)、广西六堡茶、湖北老黑茶及陕西黑茶(茯砖茶)。其中茯砖茶中的茶多酚、生物碱、茶多糖、茶氨酸等功能性成分具有降脂减肥、助消化、增强毛细血管作用、抗氧化等功效。它的独特之处在于发酵过程中的一种益生优势菌—冠突散囊菌。由于黑茶的生产工艺繁琐、发酵周期长,直接从黑茶中提取功能性成分成本较高。因此,迫切需要一种快速制备黑茶功能性成分的固态发酵技术。1.本部分探索固态发酵技术大规模制备黑茶原料,然后进行黑茶功能性成分的高效提取,在固态发酵过程中,为增加活性成分的含量,采用蓝光照射+固态发酵干扰等技术进行处理;将“发花”中后期黑茶(FHZHQ-1)、实验室固态发酵黑茶(ZCFJ-1)及蓝光照射+固态发酵干扰黑茶(LGJB-1)材料进行化学成分提取,将乙醇提取物的乙酸乙酯相、正丁醇相进行HPLC指纹图谱比对分析。结果表明,表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)在3个样品中的峰面积分别为:5020mAU*s、3715mAU*s、8286mAU*s,咖啡因(Caffeine,CAF)分别为8578mAU*s、6005mAU*s、10474mAU*s、大黄素(Emodin,EM)分别为2197mAU*s、872mAU*s、1667mAU*s。3个样品提取物总峰面积分别为6.6349mAU*S×104、6.3680 mAU*S×104、13.2257 mAU*S×104。样品FHZHQ-1在11.174min、12.071min、13.631min、16.906min处有4个新峰出现。说明添加蓝光照射+固态发酵干扰的黑茶固态发酵技术不仅能够显著提高EGCG、CAF的含量及总发酵产物的含量,而且能够在冠突散囊菌转化黑茶过程中产生新成分。2.本部分以样品FHZHQ-1和样品LGJB-1为材料,结合冠突散囊菌的大米发酵产物(DMFJ-1)为对照。通过RNA-seq技术及Illumina测序平台,获得51630个转录本,有19749条Unigene序列被注释,其中有9169条Unigenes序列被注释到GO分类的新陈代谢term中,2465条Unigene序列被注释到KEGG分类的新陈代谢分类中。对3个样本进行两两基因差异表达分析。结果表明,在DMFJ-1和FHZHQ-1两个样本之间存在1679个差异基因;DMFJ-1和LGJB-1之间存在980个差异基因;FHZHQ-1和LGJB-1之间存在2417个差异基因,其中1553个下调基因,864个上调基因。说明FHZHQ-1和LGJB-1之间差异最显著,因此,将这两个样本进行差异表达基因GO注释和富集分析。在GO富集分析中,显著性富集较强的有:光系统、光合作用、氧化还原等。在KEGG富集分类中只存在两条显著性富集term,分别为:光合作用、光合天线蛋白。因此,蓝光照射、搅拌对冠突散囊菌的次级代谢产生显著影响,且主要集中在光合作用、酶活性两个方面。3.通过水提法提取黑茶功能性成分,研制具有黑茶功能性成分的手工皂和洗面奶。手工皂的总碱量、总脂肪物、干钠皂含量与黑茶的添加量呈正相关。洗面奶的体外保湿性大致与黑茶的添加量呈正相关,温度越低、湿度越大保湿效果越好;洗面奶中添加黑茶提取物能够明显提高对DPPH自由基、羟基自由基的清除率,但对DPPH自由基的清除率更加显著。