胰岛素样生长因子结合蛋白3(Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP3)是IGFBP家族的重要成员之一。目前,在哺乳动物中有关IGFBP3的研究主要集中在调节细胞增殖、分化、生长、凋亡和先天免疫等方面,但在硬骨鱼类中有关IGFBP3的研究相对匮乏。为此,本文以卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)为研究对象,克隆并鉴定了卵形鲳鲹IGFBP3(Tro IGFBP3)基因,分析了其序列结构特征,并且对其在体内外的功能进行了初步研究。主要内容及结果如下:1.本研究从卵形鲳鲹肝脏中克隆得到了Tro IGFBP3,序列编码区长861 bp,共编码286个氨基酸,其中包含21个氨基酸的信号肽,其相对分子质量29 k Da,理论等电点为8.802。序列同源性分析表明,Tro IGFBP3与其他硬骨鱼IGFBP3有很高的同源性(58.1%～93.71%)。其中,与眼斑双锯鱼(Amphiprion ocellaris)同源性最高,达93.71%。系统进化树结果显示,Tro IGFBP3与同为鲈形目的眼斑双锯鱼聚为一个分支,亲缘关系最近。2.组织特异性分析的结果显示,Tro IGFBP3在健康卵形鲳鲹各组织中均有表达,而在肝脏、脾脏和头肾等免疫器官中表达量较高,其中在肝脏的表达量最高,在皮肤中最低。在哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)感染24 h后,Tro IGFBP3在肝脏、脾脏和头肾中的表达量均显著上调,其中在肝脏中的表达量显著上调20.21倍、脾脏显著上调13.87倍、头肾显著上调13.91倍。3.本研究成功构建并诱导表达了Tro IGFBP3的融合蛋白r Tro IGFBP3。体外实验证明,r Tro IGFBP3与头肾巨噬细胞、外周血白细胞孵育后,可显著提高巨噬细胞的吞噬活性,并且促进外周血白细胞的增殖。此外,我们还发现,r Tro IGFBP3可以显著抑制小鼠肝癌细胞的增殖,并且促进小鼠肝癌细胞的凋亡。4.亚细胞定位的结果显示IGFBP3在卵形鲳鲹吻细胞的细胞核和细胞质中均有表达;体内实验的结果表明,在鱼体中过量表达IGFBP3后,可显著提高机体抗菌能力,肝脏、脾脏、头肾在V.harveyi侵染后,细菌数量相比对照组显著降低。与此一致的是,当干扰鱼体内Tro IGFBP3的表达后,机体的抗菌能力显著降低,V.harveyi侵染后,各组织中的细菌数量显著增多。综上所述,我们的实验结果表明卵形鲳鲹Tro IGFBP3能提高机体的抗菌免疫应答,并且能够促进小鼠肝癌细胞的凋亡。该研究将丰富我们对卵形鲳鲹抗细菌免疫机制的认知,为卵形鲳鲹人工养殖的健康持续发展提供新的研究思路。此外其抗肿瘤作用也将会给生物学、医学等领域提供新的研究视角。