昆虫往往会经历季节性的低温伤害,因此它们对环境的适应能力和耐受能力就决定了它们种群的数量和分布范围。新疆荒漠地区属于典型的大陆干旱性气候,昼夜温差和季节温差非常大,常年干旱少雨。光滑鳖甲在长期的进化过程中,逐渐形成了适应新疆荒漠气候的独特机制,成功地在荒漠环境中生存和繁衍下来。研究表明昆虫抗冻蛋白在降低体液过冷却点,减少冰晶对机体的致死性伤害起到非常重要的作用。光滑鳖甲有如此高的耐寒性是否和抗冻蛋白的季节性表达有关,影响虫体抗冻蛋白表达有那些因素,这些对于荒漠昆虫耐寒性的研究是必要的。本研究采取一种全新的光滑鳖甲血淋巴的提取方法,3～9月份的血淋巴经70℃水浴初步纯化。热滞活性测定表明70℃水浴可以初步纯化出有活性的抗冻蛋白。血淋巴通过通过Tricine SDS-PAGE、Western blotting和ELISA检测光滑鳖甲抗冻蛋白表达量的季节性变化,测定初步纯化的天然抗冻蛋白的低温菌落保护试验及冰晶的修饰作用。初步探讨了冷驯化及发育对虫体抗冻蛋白表达的影响。结果显示,光滑鳖甲抗冻蛋白表达量及其活性具有明显的季节性变化,3月虫体血淋巴热滞活性为2.2℃,7月份为0.83℃,9月份为2.1℃,春秋季虫体热滞活性显著高于夏季（P<0.001）。Western blotting检测到3～4月份光滑鳖甲成虫抗冻蛋白,分子大小为10KD和12KD,5～9月份虫体抗冻蛋白含量可能较低,未检测到。ELISA检测表明3月份和9月份的抗冻蛋白含量显著高于夏季（P<0.001）。低温菌落保护试验及冰晶的修饰观察发现,3月份血淋巴对细菌具有较强的低温保护作用,并且观察到纺锤形和针型的单冰晶结构。9月份的血淋巴有一定的低温保护作用,观察到六边型单冰晶结构。7月份血淋巴对细菌低温保护作用较弱,对冰晶几乎没有修饰作用。4℃冷驯化第5天和第13天能显著提高光虫体抗冻蛋白的表达量（P<0.001）,但出现了波动。光滑鳖甲随着发育其抗冻蛋白含量不断增加,热滞活性测定和ELISA分析表明,3龄幼虫体内抗冻蛋白含量开始显著增高（P<0.001）。探讨了光滑鳖甲耐寒性及耐寒机制。不同月份光滑鳖甲-10℃的低温暴露试验表明,春秋季的虫体具有极强的耐寒性,夏季较弱。虫体通过降低自由水含量提高结合水含量,积累甘油含量,增加抗冻蛋白表达来降低虫体的过冷却点,增强其耐寒性。这对荒漠昆虫的耐寒性的全面了解提供了科学依据。