【摘 要】
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首先,利用已经从巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)Yu62噬菌体文库中克隆到的glnB基因,获得glnB突变株(glnB::Km).将含有glnB基因的重组质粒pVK-Ⅱ分别转入到A.brasilen
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首先,利用已经从巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)Yu62噬菌体文库中克隆到的glnB基因,获得glnB突变株(glnB::Km).将含有glnB基因的重组质粒pVK-Ⅱ分别转入到A.brasilense Yu62和具有一定抗铵能力的draT<->突变株中,使glnB基因的拷贝数增加,并进一步比较它们的固氮酶活性,结果表明多拷贝的glnB基因能显著提高固氮酶活性.从构建具有稳定泌铵能力的联合固氮工程菌的目的出发,对已经从A.brasilense Yu62噬菌体文库中克隆到的部分glnA基因,获得glnA<->突变株(glnA::Ω).对glnA突变株的固氮酶活性、生长性能、泌铵能力和GS酶活性测定.结果表明,glnA<->突变株固氮酶活性比野生型的高2倍左右;突变株不能利用铵和谷氨酸作为唯一氮源进行生长;glnA<->突变株可以泌铵,其泌铵能力比野生型菌株高3-4倍,硝酸盐能促进突变株的泌铵能力.
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