褐藻色素蛋白复合物的分离及特性研究

来源 :辽宁师范大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:liongliong527
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以褐藻裙带菜(Undaria pinnatifida)为实验材料,建立一套能够分离出有光活性色素蛋白复合物的技术路线.通过对裙带菜色素蛋白复合物分离技术及其影响因素的研究,确立了褐藻的SDGC分离方法.采用蔗糖密度梯度超速离心的方法,以去污剂SDS为增溶剂(SDS:Chl=20:1,4℃增溶20分钟)蔗糖密度梯度为60%、50%、40%、30%、20%、15%和10%,从裙带菜中成功地分离出5条含色素的蛋白质复合物带.测定裙带菜各色素蛋白复合物的吸收光谱、荧光发射光谱和荧光激发光谱,并进行了DCIP的光还原测定和化学法的氧化还原差示光谱测定.确定了10%和15%层带的色素蛋白复合物为捕光色素复合物;20%和30%层带的复合物为PSⅡ颗粒,具有DCIP的光还原活性;40%层带复合物为去除了捕光色素的PS Ⅰ复合物.对于有DCIP光还原活性的20%和30%层带的复合物,进一步DEAE离子交换层析纯化.150mM NaCl洗脱纯化后的样品经过荧光激发光谱测定发现,已经去除了叶绿素c和墨角藻黄素,并且仍然具有DCIP的光活性,分析是PSⅡ核心复合物.在裙带菜纯化的类囊体膜和PSⅠ复合物的荧光光谱中,均未发现属于PSⅠ的730 nm的荧光发射峰,指出730 nm荧光峰不能作为PSⅠ的表征.
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