碲化镉量子点荧光探针的合成及其在拟南芥根部成像研究中应用

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新型除草剂靶标发现和基于靶标的除草剂先导结构发现是当前制约新型高效低毒化学除草剂发展的瓶颈问题之一。建立快速简便的靶标定位方法对于新型除草剂靶标发现具有促进作用。本文以生长素型抑制剂α-烷基吲哚乙酸为活性分子,与不同表面修饰的碲化镉(CdTe)量子点共价键连接,与拟南芥共培养,确定其在拟南芥根中分布,以期建立生长素型抑制剂靶标发现的新方法。本论文工作主要分为以下三方面:1.本文综述了有关生长素作用机理、靶标蛋白、生长素型抑制剂除草剂和量子点的合成与应用等相关研究进展,提出了本论文的研究课题。2.本文合成了三种不同表面修饰的碲化镉量子点(QDs)。采用的表面修饰剂分别是巯基乙酸(MAA)、混合配体(MAA/PEG)巯基乙酸(MAA)与末端带巯基的PEG(HS-PEG-COOH)、混合配体(MAA/LSA)巯基乙酸(MAA)与本课题组合成的含双巯基的三功能聚合物(rLSA)。通过紫外吸收光谱(UV-vis)、荧光发射光谱、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、动态光散射(DLS)、透射电镜(TEM)、以及X射线粉末衍射(XRD)等手段,对合成的荧光纳米粒子的光谱特性、表面形貌、微观结构进行表征。结果表明,合成的三种碲化镉量子点光学性质稳定、平均粒径为3-5 nm,粒径分布比较均匀。相比较而言,混合配体MAA/PEG修饰的QDs各方面的性质表现更为优异。3.以生长素型抑制剂α-烷基吲哚乙酸为活性分子,与碲化镉量子点共价键连接,得到荧光纳米探针。通过溶液稳定性及拟南芥植株毒性实验表明,当荧光探针的浓度为0.25 mg/L时探针毒性最小,而且CdTe-MAA/PEG的荧光探针在植物培养基溶液中的稳定性最好。通过荧光倒置显微镜和激光共聚焦成像,结果得出荧光探针主要聚集在拟南芥根分生区的表皮细胞和成熟区的皮层细胞。文献报道,生长素受体TIR1主要存在于细胞核,也有一部分存在于细胞膜上;生长素运输蛋白PIN2的基因主要在根尖表皮细胞和皮层细胞中表达。因此,荧光纳米探针可能主要与TIR1、PIN2蛋白或它们两者特异性结合。
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