肺癌是临床最常见的肺原发性恶性肿瘤,其病理类型包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC),其中NSCLC约占肺癌总数的80%-85%。在我国肺癌是导致恶性肿瘤病人死亡的首位原因,5年生存率仅有10%,其治疗方式以手术为主,但80%的患者确诊时已处于晚期,已失去了手术治疗机会。化疗是晚期肺癌主要治疗方法之一,但随着化疗次数增多,耐药率会越来越高。目前,晚期肺癌尚无理想治疗的方法,因此,深入研究肺癌的发病机制,寻找基于病因学的潜在分子靶点,对肺癌的诊断以及防治具有重要意义。STIP蛋白是含有多个结构域的核蛋白,在核中可以自我聚集,形成rod样的结构-stiposome。在C.elegans中,利用RNAi技术敲除STIP蛋白的表达,可以使线虫的早期胚胎发育停滞于16细胞阶段,通过导入人或果蝇的stip基因可以拯救由于STIP缺失而引起的致死表型,这表明STIP在物种进化的各阶段拥有重要的保守功能。蛋白质组的研究发现STIP是核剪接体(spliceosome)的组成成员,可能参与m RNA前体中内含子的移除过程,影响细胞内基因的表达调控。然而,至今关于其在肿瘤中的表达及功能尚未有报道。本课题研究发现,与肺癌旁组织相比,STIP在NSCLC组织中显著高表达并具有统计学意义,表明STIP的表达可能与NSCLC有关。为了明确STIP在NSCLC中的生物学功能,我们构建了靶向stip基因的sh RNA慢病毒,通过MTT实验和克隆形成以及体内裸鼠成瘤实验发现,下调STIP的表达能够显著抑制NSCLC细胞系A549和H460肿瘤细胞的增殖,并且抑制NSCLC移植瘤的生长,表明STIP具有促进NSCLC细胞增殖的功能。由于细胞增殖是通过细胞周期的有序运行实现的,因此,我们进一步探究了STIP对细胞周期的影响。在A549和H460细胞中干扰STIP表达后发现细胞周期阻滞于G2/M期。检测相关调控分子的表达,发现Cyclin B1、CDK1和Cdc25C蛋白表达减少,CDK1的Thr-14/Tyr-15位点的去磷酸化被抑制。推测其机制可能是通过抑制Cyclin B1-CDK1复合物的表达及活性而导致G2/M期的阻滞。细胞周期的阻滞常伴随着细胞凋亡的诱导,为了明确STIP对细胞凋亡的影响,我们干扰A549和H460细胞中STIP表达后检测这些细胞的核形态和膜磷脂酰丝氨酸外翻的变化,发现下调STIP表达能诱导NSCLC细胞发生凋亡,其诱导的机制:一方面是通过上调促凋亡蛋白Bax以及下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达;另一方面是通过增强Caspase-9和Caspase-3的活性,诱导程序性细胞死亡。有研究表明STIP作为剪接体的组成成员,参与m RNA前体中内含子移除过程,介导基因的转录。通过转录组测序分析,我们发现在A549细胞中干扰STIP表达,同对照组相比实验组有566个表达差异基因,其中490个上调和76个下调。这些基因影响多条与肿瘤相关的信号转导通路,包括MAPK、Wnt、PI3K/AKT和NF-kB信号通路。本研究对STIP在NSCLC中的生物学功能及其相关的分子调控机制进行揭示,表明STIP可能是NSCLC中一个潜在的诊断和治疗靶标。