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近年来，男性生殖健康越来越受到威胁，男性不育率已由3:7上升到5:5，男性精子生成障碍越来越受到重视。所谓精子生成，就是指从原细胞到精子形成的连续增殖、分化、发育的过程，经历了精原细胞增殖、精母细胞成熟分裂和精子形成等三个阶段[1]。精子生成均会涉及生精细胞(spermatogenic cells)、间质细胞(LeydigCells，LCs)及支持细胞（Sertoli Cells，SCs）间的相互作用，及黄体生成素(Luteinizinghormones，LH)、卵泡刺激素（Follicle Stimulating Hormone，FSH）等性激素、雄激素（Androgen，ANG）和内源性雌激素的精密调节及众多基因的调控[2-5]。以往研究多集中在LH、FSH、ANG，而对于内源性雌激素关注较少，但内源性雌激素在雄性精子生成中具有重要的调控作用，在雄性体内内源性雌激素的主要来源是由雄激素在芳香化酶的作用下转化而来，而CYP19是芳香化酶的编码基因。研究发现[6-11]，CYP19通过调节雌激素的合成调控精子生成，睾丸中的转化生长因子1（Transforminggrowth factor beta1，TGF-β1）既可以通过抑制CYP19的表达而硬性精子生成，也可以直接影响精子生成。“肾主生殖”是中医对人体生殖功能的高度概括，就男性而言，主要包括精子的生成依赖于肾阴的滋养和肾阳的温煦，多少主要取决于肾中阴阳精气的盛衰。中医认为，肾虚是引起精子生成障碍，导致男性不育的主要原因。张仲景《金匮要略》中所记载的金匮肾气丸，是在六味地黄丸的基础上加桂枝、制附子而成，金匮肾气丸作为经典的补益肾阳方剂，对生殖系统具有明显作用，其不仅能改善肾阳虚引起的不育大鼠的精子数量及活率[12]，而且可以改善生精功能，但到目前为止，对金匮肾气丸改善肾阳虚不育的机制研究多集中通过调节在下丘脑—垂体—性腺轴的功能而促进生精功能的改善方面错误！未指定书签。，但对TGF-β1/CYP19表达的影响，鲜有报道，因此，为了进一步明确其作用机制，我们将分三部分探讨金匮肾气丸对肾阳虚模型大鼠精子生成及TGF-β1/CYP19表达的影响。第一部分：金匮肾气丸对肾阳虚大鼠精子生成及TGF-β1/CYP19的影响研究目的：观察金匮肾气丸干预腺嘌呤诱导的肾阳虚不育大鼠血清性激素水平、精子密度和精子活率以及TGF-β1/CYP19的表达的影响。研究方法：将30只成年雄性SD大鼠随机分为3组：正常对照组，模型组、治疗组，每组10只。采用腺嘌呤诱导肾阳虚不育模型，并用金匮肾气丸水煎剂13.5g/kg·d给治疗组灌胃30天，观察各组大鼠一般情况，称体重；用放射免疫法检测各组大鼠性激素水平；用精子自动检测仪检测精子的密度及活率；用免疫组织化学法检测各组大鼠睾丸中TGF-β1/CYP19的表达。研究结果：模型组大鼠体重与对照组相比明显减轻（P﹤0.05），与正常对照组相比，模型组T、E2显著降低(P<0.05)； FSH、LH水平无显著性差异(P>0.05)；精子密度显著降低（P﹤0.05），精子活率显著减弱（P﹤0.05）；免疫组化结果显示，TGF-β1和CYP19均表达于睾丸长形精子细胞，模型组大鼠睾丸TGF-β1的表达显著高于对照组，而金匮肾气丸治疗后，其表达略有降低，但金匮肾气丸治疗组TGF-β1的表达仍高于正常对照组，模型组大鼠CYP19的表达明显低于正常对照组，而金匮肾气丸治疗组的表达略高于模型组而低于正常对照组。研究结论：金匮肾气丸能够显著增加肾阳虚大鼠的体重、血清性激素水平及精子的密度与活率，降低肾阳虚大鼠睾丸中TGF-β1的表达，同时能增加CYP19基因的表达。第二部分：阻滞TGFβRⅠ后肾阳虚大鼠精子生成及TGF-β1/CYP19的表达研究目的：观察显微注射后大鼠性激素水平、精子密度及活率、TGF-β1/CYP19的表达等。研究方法：将40只成年雄性SD大鼠随机分为4组：正常组、模型组、正常+阻滞组、模型+阻滞组，每组10只。20只成年雄性SD大鼠进行显微注射TGFβRⅠ阻滞剂，阻滞TGF-β1表达；检测大鼠的性激素水平；用精子自动检测仪检测精子的密度及活率；用免疫组织化学法观察各组大鼠睾丸中TGF-β1/CYP19的表达。研究结果：进行显微注射后，模型组、正常+阻滞组、模型+阻滞组与正常组比较，血清T及E2水平升高，精子密度及活率升高，均具有统计学意义(P<0.05)；免疫组织化学结果显示，TGF-β1阳性表达位于长形精子细胞，CYP19阳性表达位于长形精子细胞和圆形精子细胞，阻滞组大鼠睾丸TGF-β1的表达明显降低，而CYP19的表达明显升高。研究结论：显微注射TGFβRⅠ阻滞剂后，大鼠睾丸精子数量有所升高，精子活率较模型组有所改善。第三部分：金匮肾气丸对抑制TGFβRⅠ的肾阳虚大鼠精子生成和TGF-β1/CYP19的影响研究目的：观察金匮肾气丸干预显微注射术后大鼠血清性激素和精子密度、精子活率的变化情况以及TGF-β1/CYP19的表达。研究方法：60只成年雄性SD大鼠随机分为正常组、正常+治疗组、模型组、模型+治疗组、阻滞组、阻滞+治疗组、每组10只。阻滞+治疗组10只成年雄性SD大鼠显微注射TGFβRⅠ后，继续灌服金匮肾气丸水煎剂治疗，30天后处死大鼠，留取血清、精液标本及睾丸组织，检测各组大鼠的血清性激素水平；用精子自动检测仪检测精子的密度及活率；用免疫组织化学法检测大鼠睾丸中TGF-β1/CYP19表达。研究结果：模型组与模型+治疗组，阻滞组与阻滞+治疗组比较，血清性激素水平、精子密度和精子活率均无显著性差异(P>0.05)；免疫组织化学染色结果显示，TGF-β1/和CYP19阳性表达位于长形精子细胞，两组大鼠TGF-β1/和CYP19表达均无显著差异，但较正常组大鼠相比，TGF-β1表达仍较高，而CYP19表达仍较低。研究结论：金匮肾气丸能显著改善模型大鼠的肾阳虚症状，增加精子生成，其机制可能是通过抑制了TGFβRⅠ的表达，进而影响了精子生成，为进一步探讨金匮肾气丸治疗雄性生殖障碍的机制提供了可靠的实验依据。