枸杞多糖对白血病细胞MICA蛋白表达水平及NK细胞杀伤敏感性的影响

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目的:白血病患者体内存在的微小残留病灶(minimal residual disease, MRD)是导致大部分患者复发的根本原因,而免疫治疗因能够激活机体的的免疫反应,可有效地清除患者体内的微量残留白血病细胞。NK细胞作为机体固有免疫的效应细胞,在免疫监视、抗肿瘤及抗感染的早期过程中发挥重要作用,其中NKG2D是NK细胞重要的活化受体,当与靶细胞表面相应配体(MICA)交联时可触发NK细胞的杀伤活性,产生对靶细胞的杀伤作用。因此,MICA的表达水平几乎决定了机体NK细胞免疫应答的强弱。研究表明:白血病细胞能通过减少其表面MICA配体的表达,逃避NK细胞的识别,使NK细胞减弱或不能对其进行有效的免疫杀伤,导致免疫逃逸的发生。因此,上调白血病细胞MICA的表达,增强NK细胞的杀伤敏感性可能成为白血病免疫治疗的有效途径之一。本实验探讨枸杞多糖对白血病细胞HL-60表面MICA蛋白表达水平及NK细胞杀伤敏感性的影响,为白血病的免疫治疗寻找新的作用靶点。方法:将与三种浓度的枸杞多糖(6mg/ml、8mg/ml、10mg/ml)共同孵育48h的HL-60细胞作为实验组(分为3组),未经枸杞多糖作用的HL-60细胞作为对照组,流式细胞仪测定各组HL-60细胞表面MICA蛋白的表达水平;按不同的效靶比混合培养NK/HL-60细胞20h,MTT法检测NK细胞对各组HL-60细胞的杀伤活性。结果:流式细胞仪检测显示实验组(6mg/ml、8mg/ml、10mg/mlLBP作用)HL-60细胞表面MICA的表达阳性率分别为(8.47±0.25)%、(10.48±0.68)%、(11.73±0.62)%;与对照组(5.75±±0.34)%相比,差异有统计学意义(P<0.05);并且随着浓度的增大,MICA的表达率升高;MTT法检测显示效靶比为5:1、10:1、20:1,枸杞多糖浓度为6mg/ml、8mg/ml、10mg/ml时,NK细胞对HL-60细胞的杀伤活性均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);并呈浓度依赖性。结论:1.枸杞多糖能升高HL-60细胞MICA的表达率,随着浓度的增大,MICA的表达率升高;2.枸杞多糖能增强NK细胞的杀伤活性,并呈浓度依赖性;3.通过提高MICA的表达水平,可能对清除微小残留病灶及减少白血病复发具有重要的意义。
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