肺泡灌洗液宏基因组二代测序在肺部感染病原体检测及指导治疗中的价值探讨

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heiefei
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[目 的]肺部感染是世界上主要的疾病负担之一,病原体检测是指导肺部感染性疾病抗生素使用的关键。分析宏基因组二代测序技术(Metagenomic Next-generation Sequencing,mNGS)对肺部感染性疾病病原体的检测能力,探讨mNGS在肺部感染诊断中的临床价值及对患者后续治疗影响。[方 法]回顾性分析,以2020年12月至2021年12月昆明医科大学第一附属医院呼吸科疑诊肺部感染的127例住院患者为研究对象。收集研究对象的基本信息(性别、年龄)、基本临床资料(基础病、行mNGS检测前抗生素使用时间、出院诊断)、实验室数据及影像学表现(mNGS检测报告、培养、涂片、呼吸道九项、肺炎及呼吸道相关病原体基因检测、病理报告及胸部CT)。所有患者入院后均行电子支气管镜检查并留取支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar Lavage Fluid,BALF)送检mNGS,同时对患者行常规检验(培养、涂片、血清学特异性抗体检测、恒温芯片扩增检测DNA),比较mNGS与常规检验对病原体检出率的差异,比较两种检验方法对阳性病例检出结果的一致性,比较两种检验方法对混合感染检出率的差异性。根据mNGS结果有无调整抗生素治疗分为3组:调整治疗方案组、维持原治疗方案组(原抗生素已覆盖部分病原体)及经验性抗感染治疗组,比较3组间患者疾病治疗有效率的差异性,探讨mNGS在肺部感染性疾病病原体检测及指导治疗中的价值。使用SPSS 25.0统计软件,两种检验方法检测情况比较用配对卡方检验,组间比较用秩和检验。[结 果]1.比较mNGS与常规检验病原体检出率的差异:本研究中,127名患者留取BALF行mNGS,同时送检常规检验,其中mNGS检出病原体98例,阴性29例,阳性率77.2%,常规检验检出病原体51例,阴性76例,阳性率40.2%,两者检出率差异具有统计学意义(P<0.001)。mNGS共检出45种病原体,其中25种细菌(最常见为肺炎链球菌33株、脓肿分枝杆菌24株、流感嗜血杆菌12株、肺炎克雷伯菌8株、结核分枝杆菌8株);8种真菌(常见为耶氏肺孢子菌12株、烟曲霉5株、新生隐球菌4株、白色假丝酵母菌2株、土霉菌2株);10种病毒(常见为EB病毒15株、巨细胞病毒11株、人疱疹病毒7型13株、人偏肺病毒1株);4种非典型病原体(肺炎支原体6株、鹦鹉热衣原体4株、解脲衣原体1株、嗜肺军团菌1株)。常规检验共检测出18种病原体,其中细菌12种(常见为肺炎克雷伯菌9株、抗酸杆菌9株、铜绿假单胞菌4株、流感嗜血杆菌4株);真菌4种(白色假丝酵母菌5株、近平滑假丝酵母菌3株、黄曲霉1株、毛霉菌1株);病毒1种(EB病毒2株);非典型病原体1种(肺炎支原体10株)。两种检验方法在细菌、真菌、病毒3类病原体检出率之间均存在差异(P<0.05),mNGS检出率更高,但在非典型病原体检出率之间无明显差异(P>0.05)。2.比较mNGS与常规检验混合感染检出率的差异:与常规检验相比,mNGS在混合感染检测方面更具优势,mNGS检测出60例混合感染,常规检验检测出4例混合感染,两者检出率差异具有统计学意义(P<0.001)。混合感染类型中,最常见的感染类型是细菌-病毒、其次是细菌-真菌和细菌-细菌。3.比较患者疾病治疗有效率的差异:根据mNGS结果调整治疗方案组、维持原治疗方案组及经验性抗感染治疗组患者的疾病治疗有效率,经两两比较发现:调整治疗方案组与维持原治疗方案组组间有效率无统计学差异(P>0.05),调整治疗方案组与经验性抗感染治疗组组间有效率有统计学差异(P<0.05),根据mNGS结果调整抗生素治疗后取得更好治疗有效率;维持原治疗方案组与经验性抗感染治疗组组间有效率有统计学差异(P<0.05),维持原方案组取得更好治疗有效率。因此,在mNGS结果指导下应用抗生素治疗肺部感染性疾病可取得更好的临床效果。4.耐药菌株的检出:127例患者中,mNGS在2份BALF样本中检测出耐药菌株,其中1株为肺炎链球菌,另外1株为金黄色葡萄球菌,耐药基因均为ErmB基因。常规检验在6份痰样本检测到耐药菌株,其中2例在mNGS检测中检测到相同菌株,但未检测到耐药基因。[结 论]1.与常规检验相比,mNGS对病原体的检出率更高,尤其在检出细菌、真菌及病毒方面。2.mNGS有助于检出混合病原体感染,最常见的混合感染类型是细菌-病毒混合,其次是细菌-真菌及细菌-细菌混合感染。3.根据mNGS结果指导抗生素治疗肺部感染性疾病,可以取得更好的临床疗效。4.mNGS可检测耐药基因,但对耐药菌株及耐药基因的检测能力仍需进一步探索。
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