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目的中枢神经系统（CNS）的炎症反应是机体应对外部刺激产生的自卫反应,可以通过清除受损伤细胞和促进神经元修复保护神经系统。然而,过度的炎症反应会导致神经系统自身损害,近年来研究发现,神经炎症反应在多种神经精神疾病,如抑郁症、阿尔茨海默病（AD）、帕金森病（PD）、精神分裂症、自闭症和脑缺血再灌注损伤等病变过程起着越来越重要的作用。脂多糖（LPS）能够引起人和动物免疫系统的强烈反应,LPS通过中枢与外周给药,已被用于制造多种炎症损伤相关的疾病模型。课题组前期研究发现,逍遥散对腹腔注射LPS诱发的母婴分离小鼠脑内小胶质细胞（MG）的异常增长、活化具有明显的抑制作用。在此基础上,本研究拟进一步明确逍遥散的抗炎作用及具体机制,并揭示其可能的作用靶点与机理,为后续中药治疗炎症相关疾病提供理论依据和实验数据支撑。方法8-10周雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组（LPS）、逍遥散组（XYS）、氟西汀组（FLU）和阿司匹林组（AS）,每组3笼,每笼5只。适应性饲养三天后,正常组及模型组饲喂正常饲料,其余各组分别给相对应的药混饲料（XYS用逍遥散3.85g/kg、FLU用氟西汀20mg/kg、AS用阿司匹林15mg/kg）喂养进行干预。在给予药混饲料喂养7d后,对正常组注射等体积生理盐水,其余四组腹腔注射LPS溶液（lmg/kg）,注射12h后立即开始行为学实验。通过开放场箱自由运动和O迷宫实验确定其行为模式。行为学实验结束后,每组随机取6只,立即麻醉及固定,取脑进行切片,剩余小鼠直接在冰上取脑,快速剥离海马及前额皮质。采用高效液相色谱法检测中枢单胺类神经递质DA、5-HT、NE及其代谢产物的表达;采用Elisa法检测血清及脑内IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS的表达水平,采用免疫组织化学法观察MG标志物Iba-1的变化;采用荧光定量 PCR检测TLR4、NF-κB、PTK、ERK1、JUNK3、raf-1、BDNF、TrkB、NR1、GluR1、GAPDH指标的mRNA表达量。结果1.腹腔注射LPS可引起小鼠行为学变化及给药组的调节作用行为学结果表明,与正常组相比,模型组的周围区运动距离、周围区进入次数、中央区停留时间均有显著减少（P＜0.01）;模型组小鼠5min中央区运动距离、5min运动总距离均有极其显著减少（P＜0.001）。与模型组相比,逍遥散、氟西汀、阿司匹林组小鼠中央区运动距离均明显上升（P＜0.05,P＜0.01）。氟西汀组小鼠周围区运动距离显著升高（P＜0.01）、5min运动总距离极其显著升高（P＜0.001）。与正常组相比,模型组小鼠5min开放臂停留时间无明显差异性;5min开放臂运动距离、闭合臂运动距离及运动总距离较正常组明显下降（P＜0.01）,5min闭合臂停留时间显著上升（P＜0.01）。与模型组相比,三个给药组小鼠开放臂停留时间及开放臂运动距离较模型组有上升趋势,但无显著差异;逍遥散、氟西汀组小鼠5min闭合臂停留时间显著下降,逍遥散、氟西汀、阿司匹林组小鼠5min闭合臂运动距离、运动总距离显著上升（P＜0.05或P＜0.01）。2.腹腔注射LPS对小鼠血清与脑内炎症介质的影响及给药组的调节作用与正常组相比,模型组小鼠血清IL-6、前额皮质IL-1β、TNF-α、海马IL-1β、TNF-α、iNOS及IL-6水平明显上升（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001）。与模型组比较,逍遥散对以上指标均有显著下调作用（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001）;氟西汀对除海马IL-1β外其余指标的水平均有明显下调作用（P＜0.05,P＜0.01）;阿司匹林对海马脑区的TNF-α、iNOS及IL-6;前额皮质IL-1β有显著下调作用（P＜0.05或P＜0.01）。3.腹腔注射LPS对小鼠脑内单胺类神经递质的影响及给药组的调节作用在海马脑区,与正常组相比,模型组的NE、5-HIAA、HVA显著增高（P＜0.05）DA、5-HT、DOPAC均有上升趋势,但无统计学差异;与模型组相比,逍遥散组小鼠NE、5-HIAA、HVA、DA、5-HT指标有及其明显下降（P＜0.01）;DOPAC明显下降（P＜0.05）。氟西汀及阿司匹林对NE、DA、5-HIAA、HVA有及其明显下调作用（P＜0.01）;对5-HT、DOPAC有明显下调作用（P＜0.05）。在前额皮质脑区,与正常组相比,模型组HVA、5-HIAA、5-HT显著上升（P＜0.05）;其余指标均有上升趋势。与模型组相比,逍遥散对DOPAC、HIAA、DA有显著下调作用（P＜0.05）,对HVA、NE有极其显著的下调作用（P＜0.01）。对5-HT有下调趋势,但无明显统计学差异。阿司匹林对所有指标均有明显下调作用（P＜0.05）,氟西汀对HVA、5-HIAA有明显下调作用（P＜0.05）。4.腹腔注射LPS对小鼠MG标志物Iba-1的影响及给药组的调节作用模型组小鼠的MG的形态发生了明显的改变,由分枝状变成了典型的“阿米巴”样。在前额皮质脑区,相较于正常组,LPS小鼠Iba-1的IOD值明显升高（P＜0.01）;相较于模型组,XYS组小鼠Iba-1的IOD显著下调（P＜0.05）。在海马CA1区,模型组小鼠Iba-1的IOD值较N组显著升高（P＜0.01）,XYS组较模型组显著下调（P＜0.05）。在海马CA3区,模型组小鼠Iba-1的IOD值较正常组显著升高（P＜0.01）,三个给药组均有下调作用;其中,XYS、FLU较模型组明显下降（P＜0.05）,AS组下调Iba-1的IOD值在三个给药组中最为显著（P＜0.01）。5.腹腔注射LPS对小鼠脑内TLR4/NF-KB信号通路的影响及给药组的调节作用在海马脑区,相较于正常组,模型组的NF-κB1、TLR4、raf-1、PTK、JNK3、ERK1的mRNA表达量显著上升（P＜0.05,P＜0.01）;与模型组相比,XYS和FLU组NF-κB1、TLR4、PTK、JNK3指标均有明显下降（P＜0.05,P＜0.01）;AS对raf-1、TLR4、ERK1的表达有显著下调作用（P＜0.05,P＜0.01）。在前额皮质脑区,相较于正常组,模型组的NK-κB1、TLR4、ERK1、JNK3、raf-1、PTK的mRNA表达量显著上升（P＜0.01）,相较于模型组,XYS、AS对JNK3、TLR4均有明显下调作用（P＜0.05,P＜0.01）;三个给药组对NK-κB1、raf-1、PTK均有明显下调作用（P＜0.01）。6.腹腔注射LPS对小鼠脑内谷氨酸受体,BDNF及其受体的影响及给药组的调节作用在海马区,与正常组相比,模型组的BDNF的mRNA表达量有下降的趋势,但无明显统计学差异。模型组的TrkB1、GluR1的表达量下降（P＜0.05）,NR1的表达量显著上升（P＜0.01）;与模型组相比,XYS、AS对GluR 1的mRNA表达量有明显的上调作用（P＜0.05）,对NR1的表达有显著下调作用（P＜0.05）。在前额皮质区,相较于正常组,模型组的BDNF、GluR1的mRNA表达量显著下降,NR1表达上调（P＜0.01）;与模型组相比,XYS、FLU对GluR1有明显上调作用（P＜0.05）;XYS显著上调TrkB1的mRNA表达（P＜0.01）;AS对BDNF有明显上调作用（P＜0.05）。结论1.腹腔注射LPS能够导致小鼠自主活动与探索能力下降,外周与中枢炎症因子、单胺神经递质及代谢产物水平上升,脑内小胶质细胞激活,成功建立神经炎症损伤模型。2.逍遥散能够通过抑制脑内TLR4/NF-κB信号通路对抗小胶质细胞活化,减少中枢炎症因子的转录与表达,改善模型小鼠的一般状态,提高其自主活动与探索能力,表现出较好的抗神经炎症作用。3.腹腔注射LPS模型小鼠海马与前额皮质GluR1表达下降,NR1表达升高;BDNF/TrkB表达下降。逍遥散可能是通过抑制TLR4/NF-κB信号通路活化,调节GluR1和NR1表达水平,上调BDNF及其受体TrkB的基因表达,发挥神经保护作用。