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研究背景:糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）是糖尿病（diabetes mellitus,DM）最为常见和严重的微血管并发症之一,也是处于工作年龄人群首位致盲性疾病。我国糖尿病患者中DR发病率高达18.2%-23,其中增殖期糖尿病视网膜病变达3.3%-7.4%。每年约有300-400万糖尿病患者因DR失明,DR的发生发展严重影响糖尿病患者的视觉质量和生活质量。目前在治疗上,西医学主要通过局部手术、药物注射、激光等治疗方法,但其治疗效果维持时间较短、并发症较多,因此具有一定局限性。而传统中医学对于DR的认识并不完善,如果依靠单纯的辨证论治,并无可靠把握改善DR的检查及化验指标。中医学中,消渴病与糖尿病最为接近,DR属于消渴病变症,多数医家称DR为“消渴目病”,归属于“雀目”“内障”“暴盲”“视瞻昏渺”等范畴。中国中医科学院广安门医院仝小林教授结合多年临床实践,提出了“态靶结合”辩治策略,即借鉴现代医学中疾病生理、病理的变化,按中医思维厘清疾病的演变态势,全方位掌握疾病归纳核心病机。仝小林院士认为DR病理改变主要经历四个阶段:络滞—络疲—络闭—络损,络脉瘀阻是其核心病机,而DR为消渴病日久所变生,具有气阳不足本虚之象,基于此提出了治疗DR的基本大法——益气温阳通络法,该治法核心药物组成为黄芪、桂枝、大黄、三七、桃仁、水蛭,课题组前期研究表明,以上述核心药物为基础加减的方药可调节糖尿病大鼠视网膜缺血缺氧状态,改善视网膜血管微循环。但目前对于该治法核心药物的作用靶点尚不明确,理论研究进度相对缓慢,而且运用传统药理实验方法很难达到预设的目标。随着系统生物学的逐渐完善,在此基础上的网络药理学结合计算机技术的蓬勃发展,出现多学科交叉的研究方法,并且已逐步应用在中医领域,这些新兴科学技术的出现,为探索糖尿病视网膜病变的理论、临床研究、药物研发等提供了新的方法策略。网络药理学的研究模式也由以往“单药物、单靶点”向“疾病—基因—靶点—药物”转变,对生物系统网络进行整体分析,分析、模拟、预测药物的药理作用机制,检验、评估药物临床治疗效果、毒副反应等,有助于中药复方活性物质、配伍规律和多途径系统调控机制的研究和复杂成分的中药新药的研发。研究目的:1.通过跟师及系统性学习仝小林院士“态靶”理论相关文献,总结其临床治疗糖尿病视网膜病变的辩治思路及用药经验,为临床治疗DR提供治疗思路。2.利用网络药理学方法分析益气温阳通络法核心药物治疗糖尿病视网膜病变的药物—靶点—疾病关系,探明其现代药理作用机制,为进一步研究益气温阳通络法提供实验研究理论依据。研究方法:1系统性学习仝小林院士“态靶”理论相关文献,并结合跟师及访谈形式收集、整理并总结仝小林院士辩治糖尿病视网膜病变的学术经验。2通过中药化学成分数据库TCMSP、TCM Database、TCMID,查找益气温阳通络法核心药物中植物药的化学成分;通过中药非靶标代谢组学方法分析益气温阳通络法核心药物中非植物药水蛭的代谢物化学成分。并通过设置OB≥30%、DL≥0.18在OMIM数据库中查找上述中药有效活性成分的对应靶点。通过OMIM及GAD数据库,找到糖尿病视网膜病变基因数据,以及相关靶点,利用软件STRING构建药物-疾病之间的PPI网络,对筛选出的靶点进行GO富集分析,并在KEGG数据库中进行代谢通路筛查,利用软件Cytoscape构建“中药-药物成分-作用靶点-作用通络”网络;分析益气温阳通络法核心药物治疗糖尿病视网膜病变的作用机制。研究结果:1总结了仝小林院士治疗DR的临床经验,即以“态靶结合”辩治策略为指导,借鉴现代医学中疾病生理、病理的变化,按中医思维厘清疾病的演变态势,全方位掌握疾病归纳核心病机,总结出了各型糖尿病视网膜病变气虚络脉瘀滞的共态,并据此创制了益气温阳通络调态治法,根据生化指标、眼底特征选择适当药物进行“打靶”,从而达到标本兼顾的目的。2经筛选得出益气温阳通络法核心药物有效活性成分,其中大黄16种,桂枝7种,黄芪20种,三七8种,桃仁23种,水蛭80种,去除重复项后共有149种。根据化学成分结构式找到110个对应的靶点蛋白。通过OMIM、GAD数据库中找到糖尿病视网膜病变相关靶点共3837种,与益气温阳通络法药物作用靶点数据集做交集后得出64个核心靶点。根据中药有效活性成分、疾病靶点的相互作用关系,进行GO富集分析得到893个生物学过程、细胞组成、分子功能,53条KEGG生物通路,对其进行气泡图可视化处理,筛选得出最相关的通路:PI3K-Akt信号通路、AMPK信号通路。结论1仝小林院士以“态靶结合”辩治策略为指导,以益气温阳通络法为核心治疗糖尿病视网膜病变的临床经验值得借鉴,为糖尿病视网膜病变中医治疗提供了思路。2对益气温阳通络法核心药物的网络药理分析,推测其能通过调节视网膜内皮细胞的凋亡途径、抑制新生血管生成,调控AMPK通路以调节调控糖脂代谢,起到多靶点的干预效应最终起到防治DR的作用。利用网络药理学分析中药复方的作用机制的可信度与各个药物及基因数据库的数据完善程度有关,且本研究的结果还需要动物实验进一步验证。