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背景：骨肉瘤(Osteosarcoma,简称OS)是青少年中最常见的一种原发性骨肿瘤,由于骨肉瘤恶性程度很高,肺部转移早,在临床做出诊断时,大部分患者已经发生肺的微小转移。目前临床上主要采用化疗与手术结合的方法治疗骨肉瘤患者。骨肉瘤的临床诊断主要根据患者的临床症状,影像学及病理学检查,这些传统的方法由于特异性不高,误诊概率大,很难实现OS的早期诊断,而且临床上骨肉瘤特异性的肿瘤标志物和预后因素很少,因此研究骨肉瘤疾病的早期诊断和预后具有重要的临床意义。越来越多的研究表明,miRNA与肿瘤密切相关,它们不仅可以作为重要的肿瘤标志物应用于早期诊断,而且还可以在肿瘤治疗过程中作为重要的预后因素。许多研究发现,在骨肉瘤的发生发展过程中,miRNA在OS组织中相对于正常骨组织中发生了特异性的变化,而在OS患者血清中,miRNA表达谱的研究还不多。因而我们推测骨肉瘤患者血清中可能存在特异性的niRNA表达谱,我们希望这种表达谱一方面可以作为骨肉瘤病人的一种无创伤性诊断标志物；另一方面,通过骨肉瘤组织和血清中异常变化的miRNA的机制研究,希望全面探究miRNA在骨肉瘤疾病发生和发展中的作用,为骨肉瘤临床治疗提供指导。目的：本课题的目的是检测骨肉瘤病人血清中可能存在的特异性的miRNA表达谱,同时检测目标miRNA在骨肉瘤治疗过程中对于化疗和手术的敏感性。方法：我们用低密度芯片技术分别对四组混合血清样本(骨肉瘤首次入院患者组5ml,手术前化疗组5m1,手术患者组5m1和正常对照组5ml)的全部miRNA进行了初筛,然后我们利用Taqman探针的RT-qPCR技术,对骨肉瘤首院组相对于对照组变化显著的miRNA进行验证,检测目标miRNA在骨肉瘤患者血清中的表达变化。同时我们选取其中的5种miRNA,检测它们在骨肉瘤治疗过程中对于化疗和手术治疗的敏感性。结果：芯片结果显示,OS血清中存在多种miRNA,从OS首院组中筛选出32种变化显著的miRNA,通过RT-qPCR复筛验证,我们发现了3种miRNA (miR-199a, miR-328和miR-32)在OS患者血清中的表达变化明显。在检测miRNA在骨肉瘤治疗过程中对于化疗和手术治疗的敏感性时,我们发现miR-199a和miRNA-32对化疗抵抗但对手术敏感。结论：miR-199a, miR-32和miR-328三种miRNA在骨肉瘤患者血清中的表达变化明显,提示这3种miRNA可能作为一种潜在的OS早期诊断标志物。miR-199a和miR-32表现出对手术敏感,可能与OS患者预后有关。同时我们根据miR-199a在OS患者血清和组织中都有明显变化,且能够影响骨肉瘤细胞系MG63的生物学功能,我们得出miR-199a是一种在骨肉瘤发生和治疗过程中极其重要的miRNA。