【摘 要】
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目的本次实验以糖尿病C57BL/6小鼠为研究对象,观察枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharides,LBP）对视网膜血管的保护作用,以及该作用是否通过影响内质网氧化应激,减少细胞凋亡实现的,以阐明LBP干预DR的机制。方法用链脲佐菌素破坏C57BL/6小鼠胰岛功能。将小鼠共分为以下几组1:对照组、模型组、模型+LBP低剂量组、模型+LBP高剂量组。基础指标（体重、饮水量
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目的本次实验以糖尿病C57BL/6小鼠为研究对象,观察枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharides,LBP）对视网膜血管的保护作用,以及该作用是否通过影响内质网氧化应激,减少细胞凋亡实现的,以阐明LBP干预DR的机制。方法用链脲佐菌素破坏C57BL/6小鼠胰岛功能。将小鼠共分为以下几组1:对照组、模型组、模型+LBP低剂量组、模型+LBP高剂量组。基础指标（体重、饮水量、进食量、空腹血糖）比较;采用光相干断层扫描（OCT）及相关血管成像技术（OCTA）扫描小鼠视网膜,观察视网膜各层结构,异常血管生成情况,眼底病变严重程度;采用视网膜切片后HE病理染色,光镜下观察生理病理组织变化;qRT-PCRs检测,测定视网膜中FN和SIRT-1含量;western blot检测pro-Caspase-12、Caspase-12、CHOP和NF-kB P65、ERK的蛋白表达。结果1.相比于模型组,LBP喂养的小鼠三多症状（多饮多食多尿）有所改善,高剂量组改善效果明显。小鼠血糖在早期轻微下降,且下降程度与浓度成正比,但到DM病程晚期每日空腹血糖各组无明显差异。2.OCT显示糖尿病小鼠视网膜各层结构紊乱;OCTA显示模型组小鼠深层血管网密度较空白对照组密度增加（P＜0.05）,两种剂量LBP干预小鼠在OCT和OTCA上均有改善效果（P＜0.05）,与浓度高低不成正比。3.视网膜HE石蜡切片显示:与对照组相比,模型组视网膜结构水肿,厚度增加,细胞间距变大,空泡组织变多。两种不同浓度的LBP对视网膜细胞均有保护作用,视网膜结构较模型组规则,视网膜水肿减轻,高剂量组LBP微观结构组织更为清晰。4.qRT-PCRs检测:与对照组相比,糖尿病模型组小鼠的视网膜中FN和SIRT-1的表达受到了抑制作用（P＜0.05）。与模型组相比,低剂量LBP干预组SIRT-1有所上升（P＜0.05）,高剂量LBP干预组SIRT-1有所上升（P＜0.01）。5.WB蛋白免疫:与对照组相比,DM小鼠中模型组pro-Caspase-12、C-Caspase-12、CHOP蛋白表达水平均下降（P＜0.05）;与模型组相比,在不同浓度LBP治疗组中pro-Caspase-12、C-Caspase-12、CHOP的蛋白表达均有明显上升（P＜0.05）,且高剂量组蛋白表达高于低剂量组（P＜0.01）。与对照组相比,DM小鼠中模型组NF-KB-P65和ERK蛋白表达水平均下降（P＜0.05）;与模型组相比,在不同浓度LBP治疗组中NF-KB-P65和ERK的蛋白表达均有明显下降（P＜0.05）,且高剂量组蛋白表达高于低剂量组（P＜0.01）。结论枸杞多糖可以保护由STZ诱导的糖尿病小鼠视网膜病变;枸杞多糖仅表现出早期轻微的降糖作用（甚至在有些组没有表现）,发病晚期降糖效果不佳,说明枸杞对视网膜的保护作用可能不是通过降糖来实现的,有可能是通过抑制Caspase 12调控内质网应激,降低NF-kB抑制炎症因子表达,促进FN的表达以增强视网膜细胞间粘附性,减少细胞丢失,从而拮抗应激作用,保护视网膜细胞,减少血管生成,减轻视网膜水肿,但疗效与浓度的相关性仍需要进一步研究。
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