博落回(Macleaya cordata(Willd.)R. Br.)隶属罂粟科植物,具有消肿、解毒、杀虫等作用,生物碱是博落回中发挥主要药理活性的物质。分离纯化博落回中的生物碱类物质对于充分研究博落回中生物碱的生物活性具有重要意义,同时也能实现对博落回的综合利用。高速逆流色谱(HSCCC)的两相即固定相和流动相都是液体,具有无不可逆吸附、进样量大、可供选择的溶剂体系广泛等多个优点,在天然产物的活性成分分离纯化领域应用广泛。离子液体具有热稳定性高、粘度可调、对大量有机物具有良好的溶解能力及可与许多溶剂形成两相体系等特性,得到了广泛的关注。本文使用离子液体作为溶剂体系改性剂,研究并建立了高速逆流色谱分离纯化博落回果荚中生物碱类物质的方法。同时根皮苷作为苹果中的特征多酚具有多种生物活性,建立一种苹果制品苹果脆和苹果酱中根皮苷的检测方法,申报推荐性国家标准,能够满足市面上这两类产品的评价和质量控制需求。因此本文就这两方面展开了研究,主要内容如下所述:1.建立了以博落回果荚为原料,从中提取生物碱类物质的方法,以及高效液相色谱(HPLC)方法用于分析提取得到的粗提物。比较高速逆流色谱和离子液体改性高速逆流色谱对博落回果荚中生物碱的分离效果。考察了 3种不同比例的二氯甲烷-甲醇-盐酸水溶剂体系对五种目标生物碱分配系数的影响,并通过高速逆流色谱实验,确定基础的溶剂体系,体积比为4:2:2的二氯甲烷-甲醇-0.3 mol/L盐酸水溶液体系,并在此基础上优化粗提物进样质量,考察离子液体的种类和用量对五种目标生物碱分离效果的影响。最终成功建立离子液体改性的高速逆流色谱方法,以二氯甲烷-甲醇-0.3 mol/L盐酸水溶液-[C4mim][BF4](1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐)(4:2:2:0.015,v/v)溶剂体系,成功从博落回果荚粗提物中分离得到原阿片碱、别隐品碱、血根碱、8-O-去甲白屈菜红碱、白屈菜红碱,纯度分别为 96.33%,95.56%,97.94%,96.22%和 97.90%。2.建立了苹果制品苹果脆及苹果酱中根皮苷的HPLC检测方法,申报推荐性国家标准。建立了苹果脆和苹果酱中根皮苷的提取方法及HPLC分析检测标准曲线,开展精密度、稳定性、重复性及试样检测与加标回收率试验。根皮苷在5-500 mg/L浓度范围线性关系良好,当苹果脆取样量为50 g时,根皮苷的检出限为1.37 mg/L,定量限为4.57 mg/L,苹果脆中根皮苷含量为9.50 mg/kg。按样品测定方法处理及测定,加标回收率在93.79%～99.93%之间,相对标准偏差不超过5%。苹果酱取样量为100 g,根皮苷的检出限为0.69 mg/L,定量限为2.28 mg/L,苹果酱中根皮苷含量为1.18 mg/kg。按样品测定方法处理及测定,加标回收率在90.56%～98.78%之间,相对标准偏差不超过5%。