【摘 要】
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目的本研究通过使用JSI-124与CA3单独或者联合应用,考察其对结肠癌(CRC)细胞系的抑制作用及YAP1和p-YAP1蛋白的表达情况是否与其对药物的敏感性有关。并构建小鼠CRC模型探讨联合用药的潜在治疗作用并评估其对淋巴细胞的影响。方法采用不同浓度的JSI-124和CA3处理HT29、LOVO、COLO205,根据细胞存活率确定用药浓度;采用流式细胞术检测两种药物对细胞凋亡的影响;采用West
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目的本研究通过使用JSI-124与CA3单独或者联合应用,考察其对结肠癌(CRC)细胞系的抑制作用及YAP1和p-YAP1蛋白的表达情况是否与其对药物的敏感性有关。并构建小鼠CRC模型探讨联合用药的潜在治疗作用并评估其对淋巴细胞的影响。方法采用不同浓度的JSI-124和CA3处理HT29、LOVO、COLO205,根据细胞存活率确定用药浓度;采用流式细胞术检测两种药物对细胞凋亡的影响;采用Western Blot检测细胞内YAP1与P-YAP1的表达;在体外水平上进行初步研究后,我们构建了使用MC38细胞荷瘤的C57BL/6小鼠模型,研究JSI-124和CA3单独或联合应用对机体内肿瘤生长的抑制作用并评估对免疫系统的影响。结果应用JSI-124与CA3作用于人结肠癌细胞系HT29、LOVO、COLO205后结果显示,不同浓度的药物可以不同程度地抑制细胞的增殖,与未处理组相比差异明显;使用流式细胞术检测结果显示,单独给药组凋亡细胞比例明显上升,JSI-124和CA3联合用药与单独给药组相比没有明显统计学差异(P>0.05);Western Blot检测结果显示:各细胞系均不同程度表达YAP(D8H1X)蛋白,表达水平依次为LOVO>MC38>COLO205。加药后的LOVO、COLO205的YAP蛋白表达水平均有降低,MC38细胞的YAP蛋白则没有显著差异。加药72小时后,各细胞系的p-YAP(ser109)和p-YAP(ser127)的表达情况各异:MC38细胞的p-YAP蛋白表达水平显著增高,COLO205细胞的表达水平则显著降低,LOVO细胞的表达水平与未处理组差异不显著;在体内实验中的荷瘤小鼠模型中,使用PBS作为溶剂稀释至CA3:2mg/kg,JSI-124:2mg/kg,腹腔连续注射10天后,与未治疗组相比用药组未明显抑制肿瘤生长并且产生腹水伴随体重减轻等毒性作用。此外,体内单独与联合用药对脾脏T、B细胞及胸腺细胞均无显著影响。结论JSI-124与CA3均可显著抑制LOVO、COLO205、HT29细胞的生长,但是JSI-124与CA3联合用药效果与单独用药差异不明显(P>0.05)。JSI-124和CA3对LOVO、COLO205、MC38均有不同程度的抑制,但是这种差异与YAP1和P-YAP1蛋白表达水平没有密切相关性。在荷瘤小鼠体内连续腹腔注射治疗后,用药组与对照组肿瘤大小并无显著差异(P>0.05);
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