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目前,体细胞重编程已经取得长足的发展,与核移植体细胞重编程(SCNT)相比,转录因子诱导的体细胞重编程(iPSC)的诱导效率仍然很低,且耗时较长。这提示,在卵母细胞中存在某些因子可以很大程度地促进体细胞重编程效率。卵母细胞包含的这些未知因子,可以将终末分化的生殖细胞(精子)或体细胞重编程回到全能状态。为了研究卵源因子在体细胞重编程过程中的作用,本研究以OSKM转基因小鼠来源的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)作为起始细胞,检测了8个卵源因子,发现Obox1、Surf4、H1foo、Wdr82和Hmg1rs1均可提高iPSC的体细胞重编程效率,其中,以Obox1的促进作用最为显著,且可以代替Sox2完成重编程。进一步研究发现,过表达Obox1在OSKM介导的重编程过程的早期发挥作用:一方面,可以通过提高上皮细胞特异基因的表达,促进间充质向上皮样的转化(MET);另一方面,可以通过调节细胞周期相关基因的表达,减缓重编程细胞的过度增殖,尤其是对THY1+细胞增殖的调控,因此,THY1-细胞和Oct4-GFP+细胞比例大幅度提高,从而促进了体细胞重编程。 此外,利用Obox1敲除小鼠,对Obox1在卵母细胞的生成和早期胚胎发育中的作用进行了初步探究。研究发现,Obox1敲除小鼠中,雌鼠的生殖能力降低,其卵巢体积减小且排卵能力下降;其敲除小鼠的早期胚胎的体外发育相对迟缓,但最终可以发育至囊胚阶段并建立起相应的ES细胞系。 总之,本研究发现了新的卵源因子对体细胞重编程的促进作用。深入研究了Obox1在体细胞重编程过程中的作用和机制,并对其在卵生成和早期胚胎发育过程中的作用进行了初步探索。Obox1作为一个卵源因子,不仅可以提高iPSC的诱导效率,而且可以代替Sox2完成iPSC的诱导。与以往发现的iPSC诱导的增强因子有所不同,其促进MET的同时减缓重编程过程中的细胞增殖,尤其是对THY1+细胞增殖的调节作用,为进一步理解体细胞重编程的机制提供了新的视角,同时,也为获得安全、高效的iPSC提供了新的途径。