卵母细胞体外成熟(IVM)作为胚胎工程的关键环节,在家畜良种繁育、资源保护及生物学研究中具有重要应用价值。但卵母细胞成熟仍面临效率低、质量差等问题,人们对其机制了解有限。SIRT6是一种NAD~+依赖性组蛋白去乙酰化酶,可参与调控小鼠卵母细胞成熟,但关于其在猪卵母细胞成熟中的功能研究尚不清楚。本研究旨在探讨猪卵丘细胞和卵母细胞来源的SIRT6对卵子成熟的影响及其机制,以明确SIRT6对猪卵母细胞成熟的调控作用,为增进对SIRT6生物学功能和猪卵母细胞成熟调控机制的认识提供依据。采用荧光定量PCR和免疫荧光染色技术检测发现:猪卵母细胞成熟期间,卵母细胞和卵丘细胞中均表达SIRT6 m RNA和蛋白。通过SIRT6抑制剂(OSS＿128167,处理组为400μM;对照组为0μM)处理卵丘包裹卵母细胞,与对照组相比发现,处理组的卵丘扩散面积(0.048±0.0073 mm~2Vs.0.026±0.0020mm~2)、卵母细胞生发泡破裂(GVBD)(24h:94.41±3.41%Vs.23.73±1.55%,28h:100.00±0%Vs.25.01±4.44%,32h:100.00±0%Vs.40.35±6.72%)、第一极体(PB1)排出率(80.60±1.28%Vs.13.95±1.41%)和孤雌激活胚胎的发育效率(卵裂率:85.52±4.41%Vs.43.69±9.97%,囊胚率:28.70±2.07%Vs.0±0%)均显著降低。相反,SIRT6抑制剂处理去除卵丘卵母细胞时,与对照组相比发现,仅能显著降低卵母细胞PB1排出率(80.67±5.60%Vs.31.80±3.39%)。然而,无论是卵丘细胞还是卵母细胞来源的SIRT6受抑制时,都会影响纺锤体和染色体的形成。不仅如此,当抑制卵丘细胞表达的SIRT6时,显著降低卵丘扩散和缝隙连接通道相关基因的表达,及卵母细胞中CDK1磷酸化水平。最后,抑制腺苷酸环化酶活性可以部分恢复SIRT6抑制剂诱导的卵丘包裹卵母细胞GVBD(23.97±7.57%Vs.57.28±12.06%)和PB1排出率(12.77±2.56%Vs.35.99±4.06%)。综上所述,SIRT6参与调节猪卵母细胞成熟;SIRT6在卵丘细胞表达并调控猪卵丘细胞扩散及卵母细胞生发泡破裂,而SIRT6在卵母细胞表达参与调控第一极体排出;无论SIRT6在卵丘细胞还是在卵母细胞表达均参与调控卵子成熟中纺锤体和染色体的形成;SIRT6介导腺苷酸环化酶活性调控猪卵母细胞减数分裂启动和成熟。