目前,三系杂交稻在水稻生产上应用广泛。鉴于三系杂交稻所作出的巨大贡献,国内外众多学者对不育系的育性恢复做了大量研究。已有的研究主要集中在恢复系中的主效恢复基因发掘,对微效恢复基因及不育系/保持系中存在的恢复基因研究还较少,这就使得研究结果还不足以解决三系杂交稻育种存在的问题,比如说不育系不稳定、保持系选育效率低及同一不育胞质籼、粳稻不育系可恢复性之间存在差异等。因此,加强保持系材料中恢复基因的研究对于三系杂交稻的选育具有重要的意义。本研究为发掘HL型籼粳保持系中的恢复基因,我们选用红莲(HL)型粤泰B与BT型、HL型广亲和粳稻不育系苏秋A进行配组,根据F1株系的育性表现来鉴定HL型籼、粳保持系(不育系)中是否携带恢复基因;在此基础上,构建同质恢群体对恢复基因进行定位,并构建同质恢近等基因系进行恢复基因的恢复力评价。结果如下:(1)不育系与F1育性鉴定表明,BT型苏秋A、HL型苏秋A及HL型粤泰A自然小穗育性均为0,BT型苏秋A/粤泰BF1与HL型粤泰A/苏秋B F1的自然小穗育性分别为34.32%与30.04%。该结果表明,粤泰B携带有BT型、HL型的恢复基因,苏秋B携带有HL型恢复基因,恢复基因均为显性基因,HL型苏秋A/粤泰B F1植株可育的表型是粤泰B与苏秋B恢复基因间互补作用形成的。(2)利用BT型苏秋A/粤泰B F2群体内作为120个单株初定位群体,根据BT型不育系具有配子体不育的遗传特征,将恢复基因定位于第10染色体上,标记STSh-7、STS10-16与该恢复基因连锁;进一步利用BT型苏秋A/粤泰B F2、F3群体内580株单株将恢复基因定位于标记RM25613与STSh-7之间约461.29 Kb物理区间内。根据基因定位结果可知,粤泰B携带的BT型恢复基因为新基因,暂定名为Rf1c。(3)本研究中采用构建HL型苏秋A/粤泰B//粤泰B同质恢株系的策略来定位苏秋B中的HL型恢复基因。利用HL苏秋A/粤泰B//粤泰B BC5F1、BC5F2群体明确了苏秋B在第3号染色体上携带一个新的HL型恢复基因,将该基因暂定名为Rf23(t),标记STS-3-10.9与Rf23(t)连锁;进一步利用BC5F3群体中共计1000单株将Rf23(t)定位于标记RM22与STS-3-10.9之间,与两标记的遗传距离分别为0.25 cM和0.4 cM。(4)同质恢近等基因系NILRf5,NILRf6与NILRf23(t)自然小穗育性考查结果表明,在HL型粤泰A背景下,Rf23(t)、Rf5与Rf6都能使不育系育性恢复正常,且基因存在剂量效应。