[目的]分析出生至学龄前健康儿童的肠道菌群结构和粪便短链脂肪酸、胆汁酸代谢水平的变化规律及相关性,寻找与儿童肠道菌群共代谢物密切相关的特征微生物群,这些数据将提供生命早期至学龄前儿童肠道菌群及其共代谢物的变化特征和相关性的信息,为今后人类肠道微生态各方面的探索研究提供了基础信息和便利,可以为许多疾病的预防和治疗提供参考,同时有利于更好地理解儿童健康和肠道菌群成熟之间的关系,便于今后从肠道健康角度更好地维护儿童健康。[方法]选取120名昆明医科大学第一附属医院出生的健康新生儿（0～28天）和150名在该医院体检的6个月至6岁健康儿童为本研究参与者,将这270名参与者按年龄分为9组（n=30人）,分别是:出生3天组、出生7天组、出生14天组、出生25天组、6个月组、1岁组、2岁组、3岁组及6岁组。收集研究对象相应时间的粪便为样本,采用16S rDNA分析肠道菌群组成,使用气相色谱法和液相质谱法测定粪便中短链脂肪酸和胆汁酸含量,通过R软件及SPSS统计软件分析不同年龄阶段儿童肠道菌群及其共代谢物的构成及相关性。[结果]1.肠道菌群的丰富度和多样性随年龄增长逐渐增高,在新生儿期很低,6月龄起明显增加,直至3岁后稳定。在门水平,0～6岁儿童肠道菌群主要是变形杆菌门、拟杆菌门、厚壁菌门和放线菌门,变形杆菌门及放线菌门丰度从出生到6岁逐渐下降,拟杆菌门和厚壁菌门则相反,变形杆菌门是新生儿期肠道菌群的主要菌门,6个月时变形杆菌门、拟杆菌门、厚壁菌门三者丰度均较高,1～6岁拟杆菌门和厚壁菌门成为儿童肠道菌群的主要菌门。在属水平,大肠杆菌/志贺菌是新生儿期肠道菌群的优势菌属,6月龄时以拟杆菌属及大肠杆菌/志贺菌为优势菌属,双歧杆菌属相对丰度达到各年龄组最高,此后大肠杆菌/志贺菌丰度下降,拟杆菌属丰度则继续增高,成为1～6岁儿童肠道菌群的优势菌属。2.按照肠型1（以大肠杆菌/志贺菌属聚类）、肠型2（以双歧杆菌属聚类）和肠型3（以拟杆菌属聚类）的顺序,肠道菌群的丰富度和多样性表现出逐渐增高趋势,新生儿期以肠型1为主,6月龄肠型2比例最高,1岁时肠道菌群由肠型2为主肠型1为辅转变为肠型2为主肠型3为辅的模式,此后肠型2随年龄增长而下降,肠型3则相反,3岁后肠型逐渐稳定。3.反应宿主不同年龄阶段40种重要肠道微生物的出现时间窗、丰度变化以及功能分析提示,肠道菌群功能转变与结构变化是同一趋势,功能随着年龄的增长逐渐趋于成熟稳定。4.粪便乙酸、丙酸和丁酸含量明显高于异丁酸和异戊酸,其中乙酸含量最高。粪便乙酸、丙酸、丁酸在3天新生儿含量最低,7天时明显增高,7天～25天无明显差异,6月龄时再次显著增加,此后的变化趋于平缓,3岁后逐渐稳定。粪便异丁酸、异戊酸在新生儿期保持在很低的水平,尤其是异戊酸浓度非常低,二者在出生6月龄显著增加,此后保持在这个水平。粪便短链脂肪酸的变化规律与Flavonifractor、Lachnoclostridium、Faecalibacterium、Lachnospiraceaege 及Enterobacter这些正相关优势菌属的丰度变化一致。5.新生儿期粪便初级胆汁酸占总胆汁酸的98%,次级胆汁酸含量极低,仅占总胆汁酸的2%。6月龄开始粪便初级胆汁酸及次级胆汁酸含量均明显增高,初级胆汁酸自此以后趋于稳定,而次级胆汁酸继续增加,直至3岁后趋于稳定。粪便次级胆汁酸的变化规律与 Escherichia-Shigella、Enterococcus、Enterobacter 和Streptococcus这些负相关优势菌丰度变化趋势相反,与Flavonifractor、Faecalibacterium、Lachnospiraceaege、Blautia、LachnospiraceaeUCG004、Lachnospira、Roseburia、Anaerostipes 和 Intestinibacter 这些正相关优势菌的丰度变化趋势一致。[结论]1.0～6岁儿童肠道菌群的发育大致可分为发育期（0～6月）、过渡期（6月～2岁）和稳定期（3～6岁）三个阶段。新生儿期肠道菌群组成和功能不稳定,6月龄明显改善,是肠道菌群发育的关键时期,此时肠道菌群的丰度和功能开始增加和改善,显著促进了短链脂肪酸和胆汁酸的代谢。2.新生儿期以大肠杆菌/志贺菌聚类的肠型为主,6月龄双歧杆菌属聚类的肠型比例最高,1岁时才出现拟杆菌属聚类的肠型,3岁后肠型逐渐稳定。3.粪便短链脂肪酸在新生儿期保持较低水平,随着肠道菌群的成熟,6月龄起明显增加,直至3岁后均趋于稳定。4.出生7天肝脏便可以有效合成初级胆汁酸,新生儿期粪便初级胆汁酸占总胆汁酸比例较高,次初级胆汁酸含量接近0。6月龄时初级胆汁酸和次级胆汁酸含量均显著上升。6月龄后初级胆汁酸含量因儿童肝功能已成熟趋于稳定,而次级胆汁酸含量则随着肠道菌群的成熟显著增高,直到3岁后趋于稳定。[目的]分析1～6月龄纯母乳喂养不同排便频次婴儿肠道菌群及粪便短链脂肪酸和胆汁酸的变化特征,探讨肠道微生物组及其代谢产物在不同排便频次中的作用机制,进一步探索不同排便频次婴儿的差异肠道菌群及其共代谢物,寻找导致不同排便频次发生的微生物生物标志物,为临床对排便异常婴儿进行治疗提供更多的生物靶点,同时也为临床使用最有效益生菌治疗提供有力的理论依据。[方法]选取昆明医科大学第一附属医院儿科门诊就诊及体检的30名1～6月龄纯母乳喂养的婴儿为本研究对象,将这30名研究对象按照排便频次不同分为3个组（n=10人）,分别是A组:3天以内排便1次或排便≤3次/天,即正常组;B组:排便＞3次/天,即排便频次增多组;C组:超过4天排便1次,即排便频次减少组。以收集的婴儿粪便为样本,采用16S rDNA分析肠道菌群组成,使用气相色谱法和液相质谱法测定粪便中短链脂肪酸和胆汁酸含量,通过R软件及SPSS统计软件分析不同排便频次婴儿肠道菌群及其共代谢物的构成差异及相关性。[结果]1.排便频次减少组的肠道菌群丰富度显著下降（P＜0.05）,排便频次增多组中个体间微生物群落异质性较大。排便频次增多或减少婴儿组中厚壁菌门有显著下降（P＜0.05）。在属水平,正常组和排便频次增多或减少组婴儿粪便中的优势菌属不同,正常组和排便频次减少组以Bifidobacterium为优势菌属,排便频次增多组优势菌属为大肠杆菌/志贺菌属,双歧杆菌/大肠杆菌（B/E）值＜1;在属水平TOP20的差异肠道微生物正常组为Phocaeicola、Blautia、Streptococcus,排便频次增多组为Clostridiumsensu stricto,排便频次减少组的差异菌属为Ruthenibacterium、Anaeromassillibacillus。2.粪便短链脂肪酸中含量最高的乙酸在正常组中比例＞80%,均较排便频次增多或减少组高,排便频次增多组与正常组的粪便短链脂肪酸无统计学差异,但均比正常组减少,异戊酸在排便频次减少组较正常组及排便频次增多组显著增高（P＜0.05）。3.在排便频次增多组中粪便初级胆汁酸CA、CDCA、GCDCA的含量比正常组升高,其中CDCA含量明显高于正常组（P＜0.05）,排便频次减少组中CA含量明显高于正常组（P＜0.05）。4.相关分析提示与差异肠道代谢物异戊酸呈负相关的正常组差异菌为Blautia、Paraprevotella、Desulfovibrio,与差异肠道代谢物CDCA、CA呈负相关的差异菌有 Ruminococcus、Agathobacter、Anaerobutyricum、Anaerostipes、Paraprevotella等5种。[结论]1.1～6月龄纯母乳喂养排便频次增多或减少组与正常组婴儿的肠道菌群及其共代谢物存在较大差异。2.Anaerobutyricum、Ruminococcus、Blautia、Agathobacter,以及一定比例的肠球菌、Phocaeicola在维系肠道菌群稳态中起着至关重要的作用。3.CDCA是排便频次增多组的差异代谢物,异戊酸、CA是排便频次减少组的差异代谢物。4.与差异代谢物呈负相关的差异菌属有Blautia、Paraprevotella、Desulfovibrio、Ruminococcus、Agathobacter、Anaerobutyricum 和 Anaerostipes 等。为临床使用最有效的益生菌,和/或改变差异代谢物在结肠的分布水平恢复婴儿正常排便的后续研究提供依据。