细胞死亡和炎症反应之间存在着密切又复杂的关系,两者相互促进又相互制约,其交互作用在许多疾病的病理发生发展过程中扮演着关键角色。RIP1激酶是调控细胞凋亡、细胞程序性坏死和炎症反应的关键蛋白之一,是决定细胞命运走向的关键分子。研究表明RIP1激酶在多种与细胞死亡和炎症反应密切相关的疾病病理过程中扮演重要角色,但其在代谢性炎症疾病包括非酒精性脂肪肝炎中的作用尚不清楚。非酒精性脂肪肝炎是多因素造成的代谢性炎症疾病,具有复杂的致病机制。研究发现游离脂肪酸FFA以及游离胆固醇等脂质在肝细胞中的过度蓄积,造成肝细胞脂肪变性,并进一步通过诱导内质网应激、氧化应激或线粒体损伤等不同机制导致肝细胞死亡和肝组织损伤,同时诱导慢性炎症反应的发生,最终导致肝纤维化。在此过程中,肝组织中过度蓄积的脂质如何引起炎症反应并导致肝组织损伤,其中的分子机制尚有待研究。鉴于RIP1激酶在调控细胞死亡和炎症反应中的关键作用,我们推测RIP1激酶也很可能参与代谢性炎症疾病的病理发展。本论文利用不同的动物模型和细胞模型,结合分子实验,对RIP1激酶在非酒精性脂肪肝炎发生发展中的作用和机制进行深入研究,获得了一系列重要结果,主要结果如下:1.RIP1激酶活性在非酒精性脂肪肝炎的发生发展中发挥重要作用:用高脂饲料（HFD）或蛋氨酸胆碱缺乏饲料（MCD）喂养野生型（WT）和RIP1激酶失活（Rip1K45A/K45A）小鼠,分别建立不同的NASH模型。在两种NASH模型中,与野生型小鼠相比,Rip1K45A/K45A小鼠的肝脏脂肪变性、肝损伤、肝纤维化程度均明显减轻。2.RIP1激酶活性通过介导细胞死亡和炎症反应参与调控NASH的病理发展:基于（1）的研究结果,我们进一步探索RIP1激酶促进NASH发生发展的分子机制,发现在HFD喂养诱导的NASH模型中,Rip1K45A/K45A小鼠肝组织中的细胞凋亡、细胞程序性坏死和炎症反应均比WT小鼠显著减少,表明RIP1激酶可能通过介导细胞死亡和炎症反应促进NASH的病理进展。3.巨噬细胞中的RIP1激酶活性在其中发挥主要作用:在不同NASH模型中,肝脏中RIP1激酶均被活化,且主要发生在肝组织的巨噬细胞中。与小鼠模型一致,我们也发现RIP1激酶在NASH患者肝脏组织中被显著激活,且免疫荧光共染结果显示RIP1激酶活化主要发生在肝巨噬细胞中。在体外用饱和脂肪酸（棕榈酸）处理,也能诱导肝巨噬细胞中RIP1的激酶活化。在BMDMs和小鼠原代Kupffer细胞中,RIP1激酶介导棕榈酸引起的炎症小体活化、细胞凋亡和程序性坏死。采用骨髓移植建立仅骨髓造血干细胞RIP1激酶失活的嵌合小鼠进一步证实,骨髓来源的巨噬细胞中的RIP1激酶在NASH的病理进展中发挥了主要作用。4.RIP1激酶活性调控内质网应激诱导的炎症小体活化:鉴于已知内质网应激在NASH病理发展中的重要作用,我们还在细胞水平研究了RIP1在内质网应激诱导的炎症小体活化中的作用。RIP1激酶抑制剂Necrostatin-1或si RNA介导的RIP1敲低能显著降低BMDMs和J774A.1巨噬细胞中内质网应激诱导的caspase-1切割和IL-1β分泌,表明RIP1激酶活性也参与调控了内质网应激诱导的炎症小体活化,其分子机制可能跟氧化自由基ROS和线粒体分裂蛋白DRP1相关。综上所述,我们的研究表明高脂喂养或者饱和脂肪酸刺激均能活化巨噬细胞中的RIP1激酶,继而介导细胞死亡、炎症小体活化以及NASH的病理进展。巨噬细胞中的RIP1激酶活性可以作为针对NASH以及其他代谢性炎症疾病的一个潜在的药物开发靶点。我们以及同期法国的一个课题组的研究表明,RIP1激酶抑制剂在小鼠NASH模型中表现出积极的治疗效果,而RIP1激酶抑制剂也进入了临床研发阶段。我们的研究结果为拓展RIP1激酶抑制剂临床研发的适应症提供了实验依据。