NGF基因转染对牙周膜细胞成骨性的影响

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目的探讨神经生长因子(nerve growth factor, NGF)基因转染对牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLC)成骨能力的影响,评价牙周膜细胞成为牙周组织再生的种子细胞的可能性及其促进牙周组织再生的作用。方法运用基因转染技术将神经生长因子(NGF)基因通过质粒pcDNA3.1-NGF转入牙周膜细胞(PDLC)中,利用免疫组化SP法及免疫印记法(Western blot)鉴定转染细胞的表达并观察其成骨能力。实验标本来自辽宁医学院附属二院正畸科拔除的成人健康前磨牙,-70°C低温冻存。统计学分析采用SPSS13.0软件包。结果1.免疫组化实验证实转染NGF的牙周膜细胞有NGF蛋白表达。2.细胞免疫组化染色可见抗波形丝蛋白抗体呈阳性反应,抗角蛋白抗体呈阴性反应,证明细胞来源于中胚层。3.转染NGF后的PDLC的骨钙素含量较未转染NGF组明显增高(P<0.01)。4.Western blot显示转染NGF组表达明显增高,且外源性DNA不影响细胞本身NGF合成。结论转染NGF后的牙周膜成纤维细胞能够明显增强细胞的成骨能力。本课题将NGF基因转染至体外培养的PDLC中,对牙周膜细胞成骨能力进行分析,使牙周膜细胞成为牙周组织再生的种子细胞成为可能,为进一步研究细胞生物学与组织工程学相结合用于修复牙周组织缺损奠定基础。
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